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ELISA试剂盒实验操作的26个小技巧总结
点击次数:1865发布时间:2017/12/29
ELISA试剂盒的优势是完善、稳定的实验体系,优秀的科研队伍,的实验设备、准确可靠的实验结果,禀存用户至上的原则,竭诚为您服务,质量是所有产品和服务*关键的组成部分,通过质量和实力赢得客户的信赖,产品的质量是企业的生命。公司一直致力于研发生产高质量的科研试剂,为生命科学提供全面的蛋白检测相关产品,对每一批产品实行严格的质控,严格控制批间差和批内差,所有出库产品皆须通过三关质检,两次核查。
我司技术老师关于ELISA试剂盒26个相关操作小技巧:
1.切记在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
2.合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
3.在吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
4.务必做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。
5.样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。
6.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
7.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。
8.ELISA试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。
9.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
10.人ELISA试剂盒洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
11.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是*后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
12.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
13.对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。
14.没有去离子水或双蒸水时,可以使用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿使用自来水。
15.在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。
16.吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,人ELISA试剂盒吸取的量不够准确。
17.吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。
19.不管是试剂盒,还是其它产品,在使用之前都要仔细阅读说明书,同时确定试剂盒是不是在有效期内。
20.标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备份,短期内无法实验者,注意低温保存。
21.根据检测标本数量确定所需试剂盒的量。
22.按说明书将所用试剂盒平衡至室温,配制所需试剂盒,DIY夹心法ELISA常见技术指南。
23.选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对,若选择两个单抗,必须识别不同表位的抗体,从同一家公司选择抗体。
24.若使用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。
25.当测定混合液体中的抗原时,如血清,建议在标本稀释液中加不相干的Ig。
26.准备好所有实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等。
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