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ELISA试剂盒实验解析
点击次数:250 发布时间:2016/5/9 9:41:11
ELISA诊断试剂经历了从合成肽向基因工程抗原的过渡。由于历史的原因,人们往往以反应本底的好坏来衡量ELISA反应试剂盒,因此有些厂家为了保持较好的本底采用了单片段基因工程抗原及合成肽包被,该类试剂盒的流行病学敏感度不够,稳定性也成问题。
请问一下国内的elisa试剂盒哪个公司的做出来的效果好?是不是盒只能做一次?
回答:试剂盒现在市场上很多,国产的,进口的。试剂盒一般倒是由包被的微孔,标准,酶,抗体组成。微孔的数量决定你能做的样品数,一般分48孔和96孔,但是每次做实验时都要将标准做上,所以96孔的也就是能坐五六十个样品。还有试剂盒的微孔都是一次使用不能重复使用。
一般试剂盒不是都分人、小鼠、大鼠的吗?比如说ELISA双抗夹心试剂盒,如果检测人的抗原就要用人的试剂盒,我想问的是,这几种试剂盒本身区别在哪里,是包被的抗体与酶标抗体来源不同吗,也就是说人的试剂盒就要都用人的抗体?
回答:你可能把抗原抗体弄错了。测人的试剂盒用的抗体是抗人的,比如测人乙肝病毒
以用小鼠抗人乙肝病毒。这样这个抗体才能与人乙肝病毒抗原反应。夹心法中,包被的抗体与酶标抗体,如果是单抗,理论是不能用一样的,不过商品化的ELISA试剂盒单抗有可能是混合单抗(识别不同的表位的抗体混在一起)这样就又可以用一样的。
也有厂家坚持ELISA试剂盒高的流行病学敏感度,科学地对待反应结果。基因工程抗原较合成肽抗原有无可比拟的优越性,就HCV-ELISA试剂盒来讲,代产品为合成肽抗原,主要是HCV 特异性抗原决定簇的肽片段;第二代产品包被的抗原既有基因工程抗原又有合成肽,只是当时的基因工程抗原不全,仅包括了HCV的核心区片段;第三代产品基本上采用了基因工程抗原,而且这些抗原包括更多、更稳定、纯度更高的HCV特异性抗原。第三代试剂的敏感度大大提高了。
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