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技术文章
大鼠ELISA试剂盒的实验挑选
点击次数：153 发布时间：2016/12/5 8:44:46
采用间接竞争大鼠elisa试剂盒方法，在酶标板微孔条上预包被T2毒素抗原，样本中T2毒素和此抗原竞争T2毒素抗体，同时T2毒素抗体与酶标二抗相结合，经TMB底物显色，样本吸光值与其含有的T2毒素成负相关，与尺度曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中T2毒素的含量。主要污染小麦、大麦、玉米等粮食作物及其制品，对人类健康及畜牧业构成了较大危害。
灵敏度：0.2ppb
回收率：110±15%
精密度：试剂盒的变异系数均小于10%
贮藏条件：保存试剂盒于2～8℃。
保存期：该产品有效期为12个月。
大鼠ELISA试剂盒适用范围：可定性、定量检测玉米、大米、豆类、花生、燕麦、饲料等样本中的T2毒素。
检测步骤
1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封，大鼠ELISA试剂盒保存于2～8℃。不要冷冻。
3、洗涤工作液在使用前也需回温。
4、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本：加标准品/样本50l到对应的微孔中，加入T2毒素酶标物50l/孔，再加入T2毒素抗试剂50l/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境中反应30min。
6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液300l/孔，充分洗涤5次，每次间隔30s，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。
7、显色：加入底物液A液50l/孔，再加底物液B液50l/孔，大鼠ELISA试剂盒轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境反应15～20min。
8、测定：加入终止液50l/孔，轻轻振荡混匀，大鼠ELISA试剂盒设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630nm检测，请在5min内读完数据），测定每孔OD值。(若无酶标仪，则不加终止液用目测法可进行判定)。
原创作者：上海研域仪器设备有限公司
