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ELISA试剂盒鸡碳酸酐酶2（CA-2）酶联免疫分析使用方法
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上传时间：2016/6/2 20:32:11
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上 传 者：上海研域仪器设备有限公司
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使用目的：
本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中碳酸酐酶 2（CA-2）含量。
elisa试剂盒鸡碳酸酐酶2（CA-2）酶联免疫分析使用方法 实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡碳酸酐酶 2（CA-2）。用纯化的鸡碳酸酐酶 2（CA-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入碳酸酐酶 2（CA-2），再与 HRP标记的碳酸酐酶 2（CA-2）抗体 ，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的碳酸酐酶 2（CA-2）呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡碳酸酐酶 2（CA-2）浓度。
标本要
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因 NaN3抑制辣根过（HRP）活性。
ELISA试剂盒鸡碳酸酐酶2（CA-2）酶联免疫分析使用方法 操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl（样品*终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
10.终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止
液后 15分钟以内进行。
操作程序总：
计算以标准物的浓度为横坐标， OD值为纵坐标，在坐标纸上，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有析出，稀释时可在浴中加温助溶，洗涤时不影响。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在 5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD值大于标准品孔孔的 OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请*后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
ELISA试剂盒鸡碳酸酐酶2（CA-2）酶联免疫分析使用方法 保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月
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