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ELISA试剂盒研发微生物学

点击次数:188 发布时间:2015/4/24 9:31:02
          近几年也将其应用到食品领域中来检测某些食品中的生理活性物质。是目前*广泛应用的标记免疫技术。1966年Nakene和Pierce共同发表了《酶标抗体:制备和抗原定位中的应用》,首先提出了酶联免疫技术(elisa试剂盒研发检测方法)的基本原理。1971年Engvall和Perlmann发表《ELISA KIT方法吸附试验测定IgG含量》一文,使酶联免疫(ELISA试剂盒检测)技术成为一种实用的检测液体标本中微量物质的方法。目前酶联免疫(ELISA试剂盒)检测技术已广泛用于免疫学、寄生虫学等。

1、单向免疫扩散法

原理:将待检抗原滴加于含相应抗体的琼脂板小孔中,经一定时间扩散后。形成乳白色的沉淀坏,在一定浓度范围内,抗原的含量与沉淀坏直径成正比。可以先用己知不同浓度的标准抗原制成标准曲线,ELISA试剂盒研发再根据测试样品沉淀环直径的大小,从标准曲线上查出样品中抗原的相应含量。

2、2双向免疫扩散法

原理:可溶性抗原与已知可溶性抗体分别加入相邻的琼脂糖凝胶板上的小孔内,在电解质存在下让它们相互向对方扩散。当两者在*适当比例处相遇时,即形成一条清晰的沉淀线。根据稀释度与已知标准品稀释度之比,可计算出抗体含量。

3、火箭免疫电泳法

原理:抗原在电场力的作用下向前移动,当抗原在通过含有一定量单一抗体的琼脂凝胶时,即形成抗原抗体复合物,比例合适即沉淀下来。因抗体迁移率低,而抗原随电泳向前移动,因而使抗原、抗体形成圆锥形的沉淀峰。在一定浓度范围内,峰的高度与抗原的浓度呈正比。

4、酶联免疫吸附法((ELISA)

原理:ELISA试剂盒研发可用于测定抗体,也可用于检测杭原。其基本原理是采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。3种必要的试剂: ①固相的抗原或抗体(免疫吸附剂); ②酶标记的抗原或抗体(标记物); ③酶作用的底物(显色剂)。

ELISA试剂盒研发过程包括:抗原吸附在固相载体上,这个过程称为包被,加待测抗体, 再加相应酶标记抗体,生成抗原--待测抗体--酶标记抗体的复合物,再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体的量。 

原创作者:上海基免科研试剂网

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