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技术文章
Elisa拟合标准曲线最合适的方程
点击次数:4881 发布时间:2015/9/17 8:13:01
根据技术员的*新整理,为大家带来了新的技术内容。今天我们就一起来看看,Elisa实验选择什么方程去拟合标准曲线*合适呢?
在s曲线的低浓度部门可以用乘幂方程很好的拟合,中低浓度部门可以用直线方程,中间部门可用对数方程,而中后段可用四参数。免疫检测时尺度点(可以是倍比稀释的,也可以不是)浓度假如和相应的吸光度(od)值假如能够呈现直线关系当然是*理想的了,这时可以通过excel等利便的获得拟合曲线,进而推算出样品的浓度值。
关于尺度曲线的拟合方式,直线、二次曲线、三次曲线、指数、对数等虽都可用于Elisa及其它生物学反应中的曲线拟合,但都只合用于曲线的一部门,有的合用于前半段,有的合用于后半段,有的合用于中间一段,而logistic曲线则对曲线的全部都有较好的合用性。在一个长的区间内,logistic应该都能拟合得较为理想。假如用来定量,s形曲线的中间段(较陡处)是比较好的,而两真个平坦部门计算误差会大,有时甚至会很大。用于免疫检测的所谓“尺度曲线"实在称为拟合曲线比较合适。目前上*流行的免疫检测拟合方式是“四参数逻辑拟合",用这种拟合方式往往能够比较精确的反映浓度和吸光度的曲线关系,从而进一步比较准确的获得样品中待测物质的浓度值。但我们做免疫检测很少有时候能够有这么理想的情况,标品浓度和相应od值往往是"s"型的曲线关系,这时就不能用直线拟合的方式了,而对拟合方法进行选择就是必要的了。枢纽在于你的尺度曲线做到了s形的哪一部门,你想检测的样品浓度在曲线的哪一部门。当然,假如用于定量,仍是在中间一段较好。但建模型是一回事,而用它来定量是另一回事。这些方法固然没有一种方法可以通用,但也都可以用。但并不是说它就是万能的。事实上不仅是Elisa,其它良多生物学反应都是s形曲线,也都可以用logistic曲线拟合。
在s曲线的低浓度部门可以用乘幂方程很好的拟合,中低浓度部门可以用直线方程,中间部门可用对数方程,而中后段可用四参数。免疫检测时尺度点(可以是倍比稀释的,也可以不是)浓度假如和相应的吸光度(od)值假如能够呈现直线关系当然是*理想的了,这时可以通过excel等利便的获得拟合曲线,进而推算出样品的浓度值。
关于尺度曲线的拟合方式,直线、二次曲线、三次曲线、指数、对数等虽都可用于Elisa及其它生物学反应中的曲线拟合,但都只合用于曲线的一部门,有的合用于前半段,有的合用于后半段,有的合用于中间一段,而logistic曲线则对曲线的全部都有较好的合用性。在一个长的区间内,logistic应该都能拟合得较为理想。假如用来定量,s形曲线的中间段(较陡处)是比较好的,而两真个平坦部门计算误差会大,有时甚至会很大。用于免疫检测的所谓“尺度曲线"实在称为拟合曲线比较合适。目前上*流行的免疫检测拟合方式是“四参数逻辑拟合",用这种拟合方式往往能够比较精确的反映浓度和吸光度的曲线关系,从而进一步比较准确的获得样品中待测物质的浓度值。但我们做免疫检测很少有时候能够有这么理想的情况,标品浓度和相应od值往往是"s"型的曲线关系,这时就不能用直线拟合的方式了,而对拟合方法进行选择就是必要的了。枢纽在于你的尺度曲线做到了s形的哪一部门,你想检测的样品浓度在曲线的哪一部门。当然,假如用于定量,仍是在中间一段较好。但建模型是一回事,而用它来定量是另一回事。这些方法固然没有一种方法可以通用,但也都可以用。但并不是说它就是万能的。事实上不仅是Elisa,其它良多生物学反应都是s形曲线,也都可以用logistic曲线拟合。
原创作者:江苏宝莱生物科技有限公司