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干细胞培养传统方法受质疑
众所周知,干细胞是很难维持和培养。像所有的真核细胞一样,它们对养分的有效性、pH值、温度、氧气和二氧化碳的含量都很敏感,而且它们也易于分化,留给研究人员的细胞不同于他们打算在实验中使用的细胞。
在早期,研究人员发现,在小鼠胚胎成纤维细胞层的顶部培养干细胞,可阻碍分化并有助于维持干细胞的健康。但是MEF特别不容易维持自我。从那时起,研究人员和生物技术公司已经开发出其他有效的饲养层细胞系,可提供干细胞培养方面的优势,以及与干细胞之间更有利的相互作用,无饲养细胞的方法也已经变得可用。
*近一项新研究,对长期持有的观念——饲养细胞为干细胞生长提供必要的营养物质并防止细胞分化,提出了一些质疑。为了调查饲养层细胞在干细胞培养中的作用,研究小组根据标准培养程序需要,首次制备了人真皮成纤维细胞培养物,但是在添加干细胞之前,他们用戊二醛或甲醛固定成纤维细胞。这会使细胞层的拓扑结构稳定,但会杀死细胞。去除固定剂之后,他们把人类诱导多能干细胞分层堆放在死亡的饲养层细胞上。
他们发现,hiPSC不仅粘附并生长为健康的培养集落,而且它们也持续表达多能性标志,从而表明分化也被阻断。这些细胞也在体内形成具有所有三个胚层的畸胎瘤,这是干细胞的一个定义性特征。
由于死亡的饲养层细胞不能给干细胞提供营养,因此这些结果表明,它们在干细胞培养中发挥的作用,并不像预期的那么重要。即使在开发出模仿饲养层形状的培养基之前,这些发现仍然可以降低成本、劳动力,并简化干细胞培养技术。