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山羊白介素10(IL-10)elisa试剂盒
点击次数：179发布时间：2015/1/6 13:07:45
更新日期：2024/9/10 16:38:05
所 在 地：中国大陆
产品型号：
优质供应
详细内容
Elisa实验法不仅可以用来测定抗体，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。此山羊白介素10(IL-10)elisa试剂盒所需器材：
1. 聚苯乙烯塑料板（简称酶标板）40孔或96孔，ELISA检测仪，50μl及100μl加样器，塑料滴头，小毛巾，洗涤瓶。
2. 小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。
3. 4℃冰箱，37℃孵育箱。
山羊白介素10(IL-10)elisa试剂盒样品操作:
1、血清……操作过程中避免任何细胞刺激.使用不含热原和内毒素的试管.收集血浓后，1000xg离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离.
2、血浆......EDTA.柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测.1000xg离心30分钟去除颗粒.
3.细胞上清液......1000 xg离心10分钟去除颗粒和聚合物.
4,组织匀浆……将组织加入适量生理盐水揭碎.1000xg离心10分钟，取上清液.
5.保存……如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70＇C保存，避免反复冷冻.尽可能的不要使用溶血或高血脂血.如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37＇C或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
山羊白介素10(IL-10)elisa试剂盒使用要点：
1. 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
7. 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
