HCCLM3细胞  ATCC来源   传代细胞

细胞操作方法介绍：

以下细胞处理方法及细胞说明书仅供参考，具体操作还需要根据到货时细胞密度，细胞生长状态等具体情况，酌情处理，如需要更详细技术指导，请及时电话或邮件联系。

需要特别指出的是：如细胞出现问题，请于48h内及时反馈，本公司将竭诚为您服务！

一．贴壁细胞

1. 客户接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。

2. 肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X 200X 各一张）。

3. 显微镜观察细胞，当细胞融汇至80%左右（可以传代的情况下），细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度，培养瓶应预留一部分培养基继续培养。

4. 严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

5. 将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

6. 用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。 

7. 1000rpm5min离心，重悬细胞。换新的细胞培养瓶，37℃5%CO2  培养。

二．悬浮细胞

1. 接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。

2. 肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X 200X 各一张）。

3. 严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4. 将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒）。

5. 1000rpm5min离心，重悬细胞。 换新的细胞培养瓶和新鲜培养基，37℃5%CO2  培养。

三．一毫升小管操作方法  小管内也是此细胞。

1. 用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）。

2. 严格无菌操作，用吸管吸出管中细胞至9ml完全培养基混匀。

3. 1000rpm5min离心，重悬细胞。

4.换新的细胞培养瓶，37℃5%CO2  培养