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L929细胞 ATCC来源 传代细胞
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详细内容
细胞操作方法介绍:
以下细胞处理方法及细胞说明书仅供参考,具体操作还需要根据到货时细胞密度,细胞生长状态等具体情况,酌情处理,如需要更详细技术指导,请及时电话或邮件联系。
需要特别指出的是:如细胞出现问题,请于48h内及时反馈,本公司将竭诚为您服务!
一.贴壁细胞
1. 客户接收到细胞,用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是灭菌过的)培养瓶外部。
2. 肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X 200X 各一张)。
3. 显微镜观察细胞,当细胞融汇至80%左右(可以传代的情况下),细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度,培养瓶应预留一部分培养基继续培养。
4. 严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
5. 将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
6. 用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
7. 1000rpm5min离心,重悬细胞。换新的细胞培养瓶,37℃5%CO2 培养。
二.悬浮细胞
1. 接收到细胞,用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是灭菌过的)培养瓶外部。
2. 肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X 200X 各一张)。
3. 严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4. 将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒)。
5. 1000rpm5min离心,重悬细胞。 换新的细胞培养瓶和新鲜培养基,37℃5%CO2 培养。
三.一毫升小管操作方法 小管内也是此细胞。
1. 用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是灭菌过的)。
2. 严格无菌操作,用吸管吸出管中细胞至9ml完全培养基混匀。
3. 1000rpm5min离心,重悬细胞。
4.换新的细胞培养瓶,37℃5%CO2 培养
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