食用油脂和含有油脂的食品,若在不适宜的条件下储存,油脂会产生一系列化学变化,致使油脂分解出醛,酮,低级脂肪酸,各种氧化物和过氧化物等,这种改变称为油脂的“酸败”。它能导致油脂性质的改变及对人体的损害。为防止氧化酸败,常在含有油脂食品及食用油中加入抗氧化剂BHA、BHT。BHA 、BHT常规分析方法有:薄层法,比色法,分光光度法,气相色谱,高效液相色谱法等。各方法的基本共同处都需采用有机溶剂从样品中将组分萃取分离出来,手续冗长,步骤多,不但繁杂,造成组分损失的机会多,对结果的准确性影响大。直接在油脂和食品中用甲醇将BHA、BHT溶解出来,在拟定的测定参数下,直接进样分离,检测同时与国标方法( GB/T5009130 - 2003(GC)法)作对照,结果吻合,证明方法可行,结果可靠。

  1　材料与方法

    1.1　试剂与仪器

甲醇;石油醚(bp130℃～60℃);BHA、BHT(纯度>99% )sigma公司。

气相色谱仪:普瑞GC-9280型气相色谱仪 FID检测器,

色谱柱:Max, 30.0×320μm×0.5μm nominal。

柱温:100℃,5℃/min升至150℃ 8min后以30℃/min升至250℃。

进样口温度: 220℃,

检测器温度: 250℃,

柱前压40 KPa,

气体流速:氮气30ml/min,氢气40ml/min,空气450ml/min不分流进样,

   1.2　BHA、BHT混合标准储备溶液

    分别准确称取1.000g BHA、BHT用甲醇溶溶解并定容至100ml,则标准溶液含各抗氧化剂10.000 mg/ml,低温避光保存。

    1.3　标准使用溶液

    准确移取上述混合标准储备溶液10.0 ml于100 ml容量瓶中,用甲醇定容得到1.0 mg/ml标准使用液。上述各试剂

    除说明外均为分析纯(A1R) 试剂, 所用水为Millipore1813MΩ·cm超纯水。

    1.4　工作曲线的制备

    取10ml具塞比色管,按顺序各加入2.0g空白(无BHA、BHT)棕榈液油,准确加入0.0、0.1、0.2、0.4、0.5 ml BHA、BHT混合标准使用溶液,混和,再按序各加入2.0、1.9、1.8、1.6、1.5ml甲醇,即得到对应的甲醇层中混标浓度为0、50、100、200、250μg/ml,将其涡旋混匀,静置分层后,吸出甲醇层于10ml离心管内,离心3～5min, (2500 r/min) ,取上清液进行测定。

    1.5　样品分析

    1.5.1　食用油　直接称取样品2.00g于10ml具塞比色管中,加甲醇2.0ml,涡旋混匀,以下按1.4标准曲线步骤进行。由峰面积代入回归方程计算结果。

    1.5.2　饼干即食面等含油脂食品　称取100g 粉碎样于250ml标准具塞锥形瓶内,加入100ml石油醚,浸渍样品,振荡放置3～4h 后,用定性滤纸过滤,再用100ml石油醚浸提样品两次,每次浸提10min左右,过滤合并滤液,于60℃水浴中挥出石油醚,余下油脂。称取该油脂2.00g于10ml具塞比色管内,加入2.0ml甲醇,涡旋混匀,以下同2.2.1步骤操作。

    1.6　结果计算

x =c×v×1000×1000/m×1000×1000

x—食品中以脂肪计BHA (或BHT)的含量,g/kg

c—根据标准回归方程计算出的待测溶液的浓度,μg/ml

v—待测溶液定容的体积,ml

m—油脂的质量,g

    2　结果与讨论

    2.1　色谱图

    BHA、BHT标准流谱图,; BHA、BHT样品流谱图。

    2.2　回归方程

    按1.4方法得BHA回归方程为: Y=2.127X-3.24; BHT回归方程为: Y=11249X-116,回归系数r=0.9997。

    2.3　样品分析结果

    样品及加标回收率测定。

    2.4　与国标法的比较

    本法与国标法的比较结果。经t检验,两法无显著性差异。

    3　小结

    BHA、BHT的GC法和ZBX法是基于二者与油脂的分离操作,即利用二者微小的极性差而进行分离,故采用的萃取试剂的性质及萃取手段必须匹配,否则难以将极小极性差异的抗氧化剂分离出来。采用直接在样品中加甲醇提取,是因为BHA、BHT在甲醇中的易溶性,而油脂难溶于甲醇的特性,将BHA、BHT从油脂中提取出来,保证了组分的纯度和质量。从本设计方案与国标法的分析结果看出,国标法存在系统偏低的趋向,是由于国标法操作中的多次转移,分离和提取过程的损失造成。本法设备简单,快捷节能,无环境污染源,结果准确,是满足出入境检验的有效方法。