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ELISA试剂盒几大常见样本处理方法
点击次数：819 发布时间：2017/12/11
elisa试剂盒几大常见样本处理方法
一、血浆血浆：
（1）血清：
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
二、 尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
三、 细胞：
细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
培养细胞内样本：
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
四、组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
1，对于样本要求保持鲜重
2，称取样本中的重量不小于50mg，一般以1g为基准
3，匀浆的比例选取10%，相当于1g组织加9ml的匀浆液来进行匀浆
4，匀浆液选取PBS（PH=7.2-7.4，浓度为0.01mol/L）
选用组织匀浆器或者碾钵进行组织匀浆！
四、 粪便样本
称取样本中的重量不小于50mg，一般以1g为基准,
2，因为粪便性质不好确定，一般情况就是称取1g+5ml的PBS进行匀浆
3，匀浆液选取PBS（PH=7.2-7.4，浓度为0.01mol/L）
标本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
