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猪肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒
点击次数:98发布时间:2019/8/5 9:27:40
更新日期:2024/9/3 11:00:15
所 在 地:中国大陆
产品型号:
优质供应
详细内容
猪肠三叶因子(ITF)elisa试剂盒
仅供研究使用
猪肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒组成:
试剂盒组成 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 8孔×12条 | 8孔×6条 | 无 |
标准品 | 0.3mL×6管 | 0.3mL×6管 | 无 |
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
备注:
1. 标准品浓度依次为:48、24、12、6、3、0 mg/L
2. 经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。
样本处理及要求
1、血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2、血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3、细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响*后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
实验需要而未提供的试剂和器材:
1、酶标仪(450nm)
2、高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3、37℃恒温箱
4、蒸馏水或去离子水
试剂准备:
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
猪肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒操作步骤:
1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3、样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4、除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7、每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
注意事项
1、严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2、洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3、消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4、底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6、在储存和温育时避免强光直接照射。
7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8、任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9、不能使用过期产品。
10、如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
实验结果计算:
以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。
猪肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒性能:
1、产品规格:48T/96T
2、灵敏度:检测浓度小于0.1 mg/L
3、特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4、重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。