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技术文章

ELISA实验样本前期准备

点击次数:17729 发布时间:2016/5/9 10:51:16

   大家都知道,实验前,我们在收集样本前都必须有一个完整的计划,首先必须清楚要检测的成份是否足够稳定。然后对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用(注:对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融

  下面我们分别对不同的样本的处理做一个简单的说明:

一、关于液体类标本:液体类标本包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1. 血清:

  室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

2. 血浆:

  应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

3. 尿液:

  用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4. 细胞培养上清:

  检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。

二、培养细胞

  检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

三、组织标本

  切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

  上海极威生物科技有限公司专业供应各类ELISA试剂盒,种类齐全,质量保障,售后完善,欢迎广大科研学者前来选购!

原创作者:上海极威生物科技有限公司

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