主要用途

组织脂褐素含量荧光定量检测试剂是一种旨在通过有机溶剂萃取可溶性脂褐素分子，直接由荧光分光光度仪分析，定量检测组织样品脂褐素含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种组织（动物、人体等）裂解悬液的脂褐素含量检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测准确。

技术背景

脂褐素（lipofusin），又称为“磨损（wear ａnd tear）”色素，是一种细胞内与年龄相关的荧光胞浆颗粒色素，主要在有丝分裂后细胞的继发性溶酶体内。脂褐素常见于老年人的永恒性非分裂性组织细胞里，例如心脏、肝脏和神经等，尤其在衰老诱导的细胞退变中聚集增多，特别是萎缩的组织。脂褐素来自于氧化的蛋白和脂质，成为细胞衰老中后期的独立指征。 基于有机溶剂可溶性脂褐素是丙二醛与游离氨基的物质交联而成的具有荧光的化合物，有机溶剂萃取后，直接通过荧光分光光度计（激发波长350nm，散发波长435nm）检测，产生荧光峰值的变化，来测定脂褐素的总含量。

产品内容

清理液（Reagent A）    XX毫升

处理液（Reagent B）    XX毫升

稀释液（Reagent C）    XX毫升

标准液（Reagent D）    XX毫升

产品说明书1份

保存方式

保存标准液（Reagent D）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，处理液（Reagent B）、稀释液（Reagent C）和标准液（Reagent D）具有腐蚀性和挥发性，密闭瓶盖，严格注意操作安全；有效保证6月

用户自备

：用于样品处理

1.5毫升离心管：用于标准液配制和样品制备的容器

2毫升离心管：用于样品操作的容器

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

DOUNCE匀浆器：用于裂解组织细胞

台式离心机：用于样品操作

比色皿：用于比色分析的容器

分光光度仪：用于比色分析

实验步骤

一、样品准备

1． 手术取出动物组织，并秤重以确定500毫克组织重量 

2． （选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管

3． （选择步骤）加入3毫升清理液（Reagent A）清洗1次

4． 移入到一个液氮冻存管

5． 即刻放进液氮罐过夜

6． 次日从液氮罐里取出，即刻（*快速度）用研磨棒碾碎组织成粉末状（注意：切莫使组织冻融）

7． 放进一个2毫升离心管

8． 加入XX毫升处理液（Reagent B） 

9． 转移到DOUNCE匀浆器

10． 用匀浆棒匀化组织（约40下）

11． 转移到15毫升锥形离心管

12． 加入2毫升用户自备的

13． 涡旋震荡10秒，充分混匀

14． 放进台式离心机离心5分钟，速度为2000g

15． 小心移取1毫升上层液相到新的预冷的1.5毫升离心管 

16． 置于冰槽里继续后续操作（注意：避免保存过夜）

二、标准样品配制

1． 准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管

2． 分别加入XX微升稀释液（Reagent C）到1至5号管

3． 移取XX微升标准液（Reagent D）到1号管，混匀

4． 小心移取XX微升1号管稀释的标准液（Reagent D）到2号管，混匀

5． 小心移取XX微升2号管稀释的标准液（Reagent D）到3号管，混匀

6． 小心移取XX微升3号管稀释的标准液（Reagent D）到4号管，混匀

7． 将1至5号管放进冰槽里备用；标准管浓度见下表

三、 标准曲线测定

1． 加入XX微升稀释液（Reagent C）到新的比色皿

2． 加入XX微升上述配制的标准液（Reagent D），混匀

3． 即刻放进荧光分光光度仪检测（激发波长350nm，散发波长435nm）：获得荧光读数

4． 重复实验步骤1至3四次

5． 构建标准曲线：纵座标（Y轴）为荧光读数；横座标（X轴）为标准硫酸奎宁/等价脂褐素含量（微克）

四、 样品测定

1． 加入1毫升上述制备的样品到新的比色皿

2． 即刻放进荧光分光光度仪检测（激发波长350nm，散发波长435nm）：获得样品荧光读数

3． 根据标准曲线获得样品对应脂褐素含量（微克）

五、 含量计算

XX

注意事项

1． 本产品为25次操作，包括标准样品

2． 操作时，须戴手套

3． 系统操作时，标准样品测定只需1次

4． 处理液（Reagent B）、稀释液（Reagent C）和标准液（Reagent D）具有腐蚀性和挥发性，密闭瓶盖，严格注意操作安全

5． 孵育时，避免光照

6． 通常脂褐素含量表述为：微克/毫克蛋白；微克/毫升；微克/组织重量

7． 本公司提供系列脂褐素检测试剂产品

质量标准

1． 本产品经鉴定性能稳定

2． 本产品经鉴定检测敏感

使用承诺

秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号名称规格

GMS50365.2组织脂褐素含量荧光定量检测试剂盒20次

GMS50365.2A清理液（Reagent A）100毫升

GMS50365.2B 处理液（Reagent B）50毫升

GMS50365.2C 稀释液（Reagent C）50毫升

GMS50365.2D 标准液（Reagent D）5毫升

试剂盒订购信息

原创作者：上海极威生物科技有限公司