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技术文章
ELISA标本如何制备和贮存
点击次数:17590 发布时间:2018/7/31 21:24:02
Elisa实验中会经常用到不同的检测标本,下面我们列一下各类标本的处理方法及如何存贮:(我司可提供实验代测服务,如有需要,可来电咨询相关业务员,另外:公司目前产品线齐全,除elisa试剂盒外,还有细胞株,标准品,培养基,另外还提供各类实验外包服务):
1,检测可溶性蛋白:根据产品说明书制备血清、血浆标本,由于有些样品对温度敏感极易丧失活性,应尽快分离并分装(一般300~500ul/管),大多数标本收集和实验在同一天应贮存在2~8℃。若无法立即测定,应贮存在-70℃,标本贮存时间一般不宜过长,避免反复冻融。使用前将标本平衡至室温,融化标本严禁使用水浴锅。冻存后或冷藏时间过长的标本可能会出现沉淀或小凝集块,应在实验前离心或过滤(0.45um滤膜)标本,体积少的标本不建议过滤。所有标本的收集要使用无菌管,在无菌/半无菌条件下操作防止污染。
2,血清:将血液在室温凝集10~15分钟,1500g离心20~30分钟,小心吸取血清。
3,血浆:按试剂盒中的说明书选择抗凝剂。收集血液时,轻轻摇动试管使抗凝剂与血液充分混合。将血液在室温保存 10~15分钟,1500g离心15~20分钟,小心吸上层血浆。
4,尿液:将尿液收集在无菌的容器内。1500g离心10~15分钟或过滤(0.45um滤膜)去除杂质。注意:对于尿液标本实验的回归系数可能发生变化。
5,细胞培养上清液:1500g离心10~15分钟去除细胞和细胞残渣。若使用常规典型的培养基,应制备两条标准曲线,一条使用标准品稀释液/或实验缓冲液配制标准品,另一条以细胞培养基配制标准品。若两条标准曲线的变化范围在10%内,实验结果可用任一曲线分析。
6,检测细胞相关和细胞内蛋白:细胞相关蛋白和其它细胞内蛋白在ELISA实验前需要对标本进行处理将目的蛋白释放出来。
以上是我司技术人员罗列出来的常用的样本处理及保存方法,仅供大家参考,如有其他疑问,可来电咨询我司相关人员。
原创作者:上海极威生物科技有限公司