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大鼠线粒体呼吸链复合物II(complex II)试剂盒ELISA使用说明书@产品频道
点击次数: 702发布时间:2011/3/7
资料简介: 11月9日报道,大鼠线粒体呼吸链复合物II(complex II)试剂盒ELISA使用说明书@产品频道介绍,本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中大 鼠线粒体呼吸链复合物II(complex II)的含量。 l 有效期:6个月 l 保存条件:2-8℃ l 本试剂盒仅供科研使用,不得用于临床诊断 大鼠线粒体呼吸链复合物II(complex II)试剂盒ELISA使用说明书@产品频道,实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠线粒体呼吸 链复合物II(complex II)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测 抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在 酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠线粒体呼吸链复合物II(complex II)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。 大鼠线粒体呼吸链复合物II(complex II)试剂盒ELISA使用说明书@产品频道,注意事项: 1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室 温 20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。 2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中 不要让微孔干燥掉。 3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响 OD 值。 4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。 5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。 6. 在储存和温育时避免强光直接照射。 7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。 8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏 试剂盒中反应试剂的生物活性。 9. 不能使用过期产品。 10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。 大鼠线粒体呼吸链复合物II(complex II)试剂盒ELISA使用说明书@产品频道,试剂准备:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。 大鼠线粒体呼吸链复合物II(complex II)试剂盒ELISA使用说明书@产品频道,操作步骤: 1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。 2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL; 3. 样本孔中加入待测样本 50μL;空白孔不加。 4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。 5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸 上拍干,如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。 6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。 7. 每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。 elisa试剂盒用户:ELISA实验中温育温度有哪几种? 极威生物解答:温育常采用的温度有 43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时,产物的生成可达顶峰。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜,以形成*多的沉淀。但因所需时间太长,在ELISA中一般不予采用。
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