资料简介：  A20小鼠B细胞淋巴瘤细胞的介绍说明 极威生物

Catalogue No.: C346

Product Format: a T25 flask

Culture Properties：半贴壁(贴壁弱，消化时间短)

Complete Growth Medium: 89%1640+10%FBS+1%双抗

Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

Application:  Cells ａnd cancer research

NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Components  

Operation steps for cell culture

1. 轻轻吹匀细胞，收集悬液1000rpm(150g左右)离心3min，弃上清；

2. 用新的完全培养基重悬细胞，均匀分为几份，接种到新的培养瓶中，并补加足量的完全培养基；

（细胞比较依赖细胞密度，细胞传代前及传代后密度不宜过低，过低可能会导致细胞生长缓慢或者死亡。细胞传代前培养基不能完全变黄，不然细胞状态变差会导致传代失败。传代过程吹打细胞应尽量轻柔，不应吹出过多气泡。）

3. 将细胞放回37度培养箱继续培养。

传代比例: 不同细胞生长速度不一，具体传代比例视细胞生长速度而定，大部分细胞适用1:3-1:4传代，生长较慢的细胞可以1:2传代。

Cell cryopreservation

1.冻存液：92%完全培养基+8%DMSO（可以根据实验室条件自行选择）

2.降温步骤：4度10min，-20度2h，-80过夜后液氮保存。

Tips：

1. 细胞经过运输后，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900-1000rpm(约150g)离心3min，弃上清。加5ml PBS重悬细胞，再900-1000rpm(约150g)离心3min，用新鲜的完全培养基重悬接种到新的培养瓶。第二次PBS重悬是为了去除碎片，如果平时碎片比较少，传代时可以省略PBS重悬的步骤；如果碎片很多，建议PBS多洗几次。

2. 细胞生长不均时，可以将细胞消化吹散后加入新的培养基重新接种或传代。

3. 细胞生长缓慢时，可以选择提高血清浓度培养（不超过20%），也可以根据细胞生长状态，选择传代细胞到新的培养瓶中继续培养。

4. 不同细胞贴壁性差异比较大，所以消化时间差别较大，20s-10min均有可能，具体以细胞消化到相互分离但未脱落，并可以轻轻吹下为准，严禁消化到细胞完全漂浮。客户消化过度导致细胞死亡、漂浮、生长缓慢，不提供免费售后服务。

5. 干冰发货均为两支，客户先复苏一支，若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支。若客户同时复苏两支均状态不佳，我方不提供免费售后服务。

6. 细胞状态正常时，应尽快冻存细胞保种，冻存后应随机抽取一支检测冻存效果。我方不对客户冻存细胞导致死亡负责，客户冻存细胞死亡不提供免费售后服务。

Notice：

      客户收到细胞有任何疑问请及时致电我们，细胞收到后1周内没有任何电话，或其他形式回访，默认为细胞质量没问题，之后出了任何问题不给予免费售后。细胞免费售后只提供一次，若重发后再次培养死亡不再免费补发，细胞收货时已经死亡或密度不足的除外。

尊敬的客户：

您好！上海极威生物科技有限公司（Shanghai JIwei Biological Technology Co., Ltd.）成立于上海，是一家专业从事“产品研发、市场销售、技术服务”为一体的高科技生物技术公司。极威生物依托国内外技术研发人才的优势，由留美资深科学家与数位国内多年从事生物领域研究的博士、硕士等高校生物领域研究人员共同创立，在科学研究和医疗检测领域享有极高的声誉，经过多年的努力发展已成为专业供应各类生物科研用品的公司，长期专注于生物领域，旗下产品种类众多。极威生物秉承以产品质量为根本，以市场需求为导向，以为客户创造价值为己任的精神，致力于发展中国的科研事业。力求为我国生物科技事业提供更好的、更专业性的技术服务和科研产品。自公司成立以来，公司的销售额保持高速增长，企业规模不断扩大，研发产品包括elisa试剂盒，生化试剂盒，动物血制品，抗体，标准品，生化试剂，实验耗材等10万余种类，公司长期致力于elisa试剂盒、生化试剂盒的研发，为客户提供生化试剂盒、ELISA试剂盒、技术服务等一系列实验代测服务。

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