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人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶联免疫分析@寒潮来袭
人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
96T
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)
表达。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人1,3βD 葡葡糖苷酶(1,3βDGlu)表达。用纯化的
人 1,3βD 葡葡糖苷酶(1,3βDGlu)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中 1,3-βD
葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的
1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)抗体结合,形成抗体抗原酶标抗体复合物,经过洗
涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终
的黄色。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF 值相比较,从而判定
标本中人1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)的存在与否。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 阳性对照 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 阴性对照 0.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2 孔、阳性对照2 孔、空白对照1
孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50 l。然后在待测样品孔先
加样品稀释液 40 l,然后再加待测样品 10 l。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不
触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 后弃去,如此
重复5 次,拍干。
原创作者:上海杏宜生物科技有限公司