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人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶联免疫分析@寒潮来袭

点击次数:261 发布时间:2021/11/11 18:26:54
 

1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

96T

使用目的:

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)

表达。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人1,3βD 葡葡糖苷酶(1,3βDGlu)表达。用纯化的

 1,3βD 葡葡糖苷酶(1,3βDGlu)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中 1,3-βD

葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的

1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)抗体结合,形成抗体抗原酶标抗体复合物,经过洗

涤后加底物TMB 显色。TMB HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终

的黄色。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF 值相比较,从而判定

标本中人1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)的存在与否。

试剂盒组成

1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1  7 终止液 6ml×1 

2 酶标试剂 6ml×1  8 阳性对照 0.5ml×1 

3 酶标包被板 12 ×8  9 阴性对照 0.5ml×1 

4 样品稀释液 6ml×1  10 说明书 1 

5 显色剂A  6ml×1  11 封板膜 2 

6 显色剂B  6ml×1/ 12 密封袋 1 

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能

马上进行试验,可将标本放于20保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含 NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2 孔、阳性对照2 孔、空白对照1

孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)

2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50 l。然后在待测样品孔先

加样品稀释液 40 l,然后再加待测样品 10 l。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不

触及孔壁,轻轻晃动混匀,

3. 温育:用封板膜封板后置37温育 30 分钟。

4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 后弃去,如此

重复5 次,拍干。

原创作者:上海杏宜生物科技有限公司

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