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绵羊白细胞介素2(IL-2)酶联免疫分析试剂盒说明书

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上传时间:2015/10/10 13:43:19

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上 传 者:上海杏宜生物科技有限公司

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羊白胞介素2IL-2酶联免疫分析

 

 

试剂盒使用

 

 

试剂供研究使用。

 

 

检测                                                                                                                                         96T

 

0.5ng/L - 8ng/L

 

使用目的:

 

试剂盒用于羊血清、血及相关液体本中白胞介素 2IL-2)含量。

 

实验原理

 

试剂用双抗体夹心法本中羊白胞介素 2IL-2)水平。用化的羊 白胞介素 2IL-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被抗的微孔中依次加入白 胞介素 2IL-2),再与 HRP 标记的白胞介素 2IL-2)抗体合,形成抗体-抗原-酶标抗 体复合物,经过彻底洗后加底物 TMB 色。TMBHRP 的催化下化成色,并在 酸的作用下化成*的黄色。色的深浅和品中的白胞介素 2IL-2)呈正相关。用 酶标仪450nm定吸光度(OD ),通过标准曲线计品中羊白胞介素 2

IL-2度。

 

试剂

 

1

30 浓缩

30ml×1

7

止液

6ml×1

 

 

 

 

 

 

2

酶标试剂

6ml×1

8

准品(16ng/L

0.5ml×1

 

 

 

 

 

 

3

酶标包被板

12 孔×8

9

准品稀

1.5ml×1

 

 

 

 

 

 

4

品稀

6ml×1

10

1

 

 

 

 

 

 

5

A

6ml×1

11

封板膜

2

 

 

 

 

 

 

6

B

6ml×1/

12

密封袋

1

 

 

 

 

 

 

 

本要求

 

1本采集后尽早行提取,提取按相关文献行,提取后尽快实验。若不能 试验,可将本放于-20℃保存,但避免反复

 

2.不能检测含 NaN3 的品,因 NaN3 抑制辣根氧化物的(HRP)活性。

 

操作步

 

1.         准品的稀:本试剂盒提供原倍准品一支,用可按照下列表在小管中行稀

 

8ng/L

5 准品

150μl 的原倍准品加入 150μl 准品稀

 

 

 

4ng/L

4 准品

150μl 5 准品加入 150μl 准品稀

 

 

 

2ng/L

3 准品

150μl 4 准品加入 150μl 准品稀

 

 

 

1ng/L

2 准品

150μl 3 准品加入 150μl 准品稀

 

 

 

0.5ng/L

1 准品

150μl 2 准品加入 150μl 准品稀

 

 

 

 

 

 

2.         :分别空白孔(空白照孔不加品及酶标试剂,其余各步操作相同)、准孔、

 

测样品孔。在酶标包被板上准品准确加50μl,待测样品孔中先加品稀40μl, 然后再加待测样10μl品* 5 倍)。加品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻混匀。

 

3.         温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30

 

4.         配液:将 30浓缩液用蒸30 倍稀

 

5.         :小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。

 

6.         :每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。

 

7.         温育:操作同 3

 

8.         :操作同 5

 

9.         色:每孔先加入 A50μl,再加入 B50μl轻轻混匀,37℃避光

 

15 分.

 

10.     止:每孔加止液 50μl止反(此时蓝色立黄色)。

 

11.      定:以空白空零,450nm依序量各孔的吸光度(OD )。在加

 

液后 15以内行。

 

 

准物的横坐OD 值为纵,在坐标纸准曲线,根据品的 OD 准曲线查出相度;再乘以稀倍数;或用准物的度与 OD 值计算出

 

准曲线的直线方程式,将品的 OD 代入方程式,算出度,再乘以稀倍数, 即为样品的实际浓度。

 

注意事

 

1试剂盒从冷藏境中取出在室温平衡 15-30 后方可使用,酶标包被板开封后如未 用完,板条装入密封袋中保存。

 

2液可能会有晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响果。

 

3.各步加使用加器,并常校其准确性,以避免试验误差。一次加样时间 控制在 5内,如本数量多,推荐使用排

 

4 每次定的同准曲线,做复孔。如本中待含量高( OD 大于准品孔孔的 OD ),先用品稀液稀一定倍数(n 倍)后再定, 时请*后乘以倍数(×n×5)。

 

5 封板膜只限一次性使用,以避免交叉染。

 

6.底物避光保存。

 

7格按照的操作行,试验结果判定必酶标仪读.

 

8.所有品,洗液和各种弃物都染物理。

 

9.本试剂不同批号分不得混用。

 

10. 如与英文有异,以英文书为准。

 

保存条件及有效期

 

1试剂盒保存:;2-8℃。

 

2.有效期:6 个月

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