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名称：北京现货T4 DNA连接酶供应
产地：国产|进口
规格：200U
编号：BTN60609
英文名：T4 DNA Ligase
品牌：百奥莱博
产品简介:
T4 DNA连接酶从表达T4 gene 30的E.coli 细胞中分离纯化而得,由一个分子量为68 KDa的单亚基组成。
1.催化连接反应,即dsDNA,dsRNA和DNA/RNA分子的粘性末端和平末端5＇-P末端和3＇ -OH末端之间形成磷酸二酯键。
2.修复dsDNA反应中的切口(Nick)
3.催化pyrophosphate 和ATP之间的磷酸交换反应(Weiss酶单位定义原理)
4.需要ATP、Mg2+ 和DTT,*佳pH为pH 7.5-8.0。
5.NaCl 浓度在200 mM以上时有抑制作用。
6.1 %-10% PEG和 150-200 mM NaCl能促进连接反应(尤其是平末端DNA)效率。
质检标准:
无endodeoxyribonucleases,exodeoxyribonucleases,phosphatases ａnd ribonucleases污染。SDS-PAGE下呈单一带,纯度>99%。
活性单位定义(此处是Weiss单位)以Oligo(A)n为底物,在5℃、10分钟内使1 pmol 的[5＇ -32P ]pCp掺入酸不溶性深沉物所需要的酶量定义为1个活性单位(U)(RNA3＇末端标记反应)。66 mM Tris-
HCl(pH 7.6),6.6 mM MgCl2,0.066 mM ATP,10 mM DTT,3.3 μM [32PPi].66 mM Tris-HCl(pH 7.6),6.6 mM MgCl2,0.066 mM ATP,10 mM DTT,3.3 μM [32PPi]。
Buffer成分:
储存Buffer:20 mM Tris-HCl(pH 7.5),1 mM DTT,50 mM KCl,0.1mM EDTA和50%(v/v)glycerol。反应Buffer,10×:400 mM Tris-HCl,100 mM MgCl2,100 mM DTT,5 mM ATP(pH 7.8 at 25℃)。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。.jpg)
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