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名称：T4 RNA连接酶 2(截短型 K227Q)厂商
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：T4 RNA Ligase 2(truncated K227Q)
规格：2000U
编号：BTN130857
产品简介:
T4 RNA连接酶 2(截短型 K227Q),又称T4 Rnl2tr K227Q, 可特异地将5＇ 末端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA 3＇ OH 末端。该酶连接时不需要ATP,但需要预腺苷化的接头。T4 Rnl2tr K227Q 是 T4RNA连接酶 2 截短型 的点突变体,K227 的突变减少了酶、赖氨酰及腺苷复合物的形成,也降低了非特异性的连接产物(多连体和环状体) ,后者可能是通过降低该酶从接头向RNA5＇磷酸基转运腺苷基团的微量活性而实现的。 该酶在连接反应中,无需 ATP,利用预腺苷化的接头和降低的酶-赖氨酰腺苷化活性能将连接背景降为。此酶已被用于 microRNA 克隆中接头的优化连接。
1.将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3＇ 末端
2.将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上,用于 cDNA 克隆文库构建
3.将单链腺苷化引物连接至 RNA 上,用于链特异 cDNA 文库构建
4.无单链和双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶的污染。
反应条件:
1X T4 RNA连接酶反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃) ,10 mM MgCl2,1 mM DTT],25℃ 温育。
单位定义:
200 单位指 10 μl 反应体系中,25℃ 条件下,1 小时将 80% 的 31-mer RNA连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端 [通用 miRNA 克隆接头] 所需的酶量。
5´-FAM- rArGrUrCrGrUrArGrCrCrUrUrUrArUrCrCrGrArGrArUrUrCrArGrCrArArUrA-3´5´-rAppCTGTAGGCACCATCAAT–NH2-3´
Buffer成分:
10 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,0.1 mM DTT,0.1 mM EDTA,50% Glycerol,pH 7.5 @ 25℃
热失活:
65℃ 加热 20 分钟。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。.jpg)
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