新一代双光束紫外检测仪产品隆重上市 作者：陈茜芝 刘爱琴 1、双光束紫外检测仪研发的背景 2、双光束紫外检测仪与国产仪器和国外仪器的比较 一、背景 双光束、单光束紫外检测仪都是液相色谱中的一种紫外检测仪，它是用来监视生物化学、分子生物学、制药、食品等行业在柱层析分离分析时必不可少的设备。目前在市场中多数的产品为“核酸蛋白检测仪”，该仪器基本上是七十年代生化所转让的产品，鉴于当时受技术水平、市场元器件等限制，因此虽试制成功，但还存在许多问题：如基线漂移、换档零点不准等，为此当时市场上虽有十几家生产厂家，但它们几乎是同一产品，同一面孔，同一性能，无法满足用户的需求。而进口的仪器如法玛西亚等价格昂贵。而国产的核酸蛋白检测仪却大大落后于市场，许多急待改进部分却很少有制造商、厂家进行研究改造，20年来除了面目稍有改进，内部结构几乎不变。 不足之处： 1、该仪器光源：因为核酸蛋白检测仪器里用的是汞灯，它的特定谱线是253.7nm，而在生化等行业里检测核酸用的波长为260nm，在检测浓度高的样品中问题不大，但在进行少量宝贵样品中而浓度又比较稀的情况下，得出的结果偏差就大了。 2、在光电转换中核酸蛋白检测仪用的是光电倍增管，我们知道光电倍增管体积大，占地大，并且还需要高压电源支撑，高压电源稳定度直接影响到整个仪器稳定度，做的好不好非常关键，再加上光电倍增的暗流，随温度 变化等不确定性，是造成仪器不容易做好根本原因，现在市场上进口仪器基本上都是用光敏二极管来做转换器，体积小（只有一只三极管之大），性能稳定，暗流小，如此的技术核酸蛋白检测仪却弃之不用。 3、现在市场上的核酸蛋白检测仪看上去具有 254nm、280nm波长可测定，实质上在用254nm测定核酸时还可以（真正核酸测定是260nm），但在用280nm去测蛋白时，却有些牵强。因为此时它们的能量很弱，进口的仪器在用汞灯作光源测蛋白时，它的280nm波长取得是采用荧光将254nm通过荧光转换为280nm，然后再用280nm滤光片取得280nm波长去检测蛋白的，而在国产核酸蛋白检测仪器中，因无此类技术（荧光粉有毒不好做，也没这门手艺）所以省去了此道工序，就只能用280nm 滤光片取得280nm波长。结果因为汞灯的特征谱线为254nm，280nm波长是该谱线的延伸段，与254nm相比光强度几乎是它的1/10，因此虽然用280nm滤光片，但因254nm能量太强，它照样能透过滤光片进入测量系统，结果测出峰为：254nm、280nm波长的共同吸收峰，因此该种仪器如作教育工具还可以，在科研领域研究中，在制药行业中是非常非常不利的。 4、市场上核酸蛋白检测仪在线路设计上有问题，比如在无样品的情况下，灵敏度换档时在记录仪反映的基线会有很大变化，这样对操作者很麻烦，如果在监视过程中发现峰形太大或太小时，想要改变灵敏度得到合适峰时，因基线基准点变化，峰值就受影响，结果就不准确，在灵敏度＞1od时，仪器零点与记录仪零点偏差极大，以其无法工作。 5、现在市场上还有一种紫外检测仪器是用元素灯作为光源的，虽然该灯的谱长比较汞灯来说单色性较好，但元素灯寿命短，一般2000小时，不宜作为长时间监测，经常更换灯成本高。 另外，市场上核酸蛋白检测仪基本上都是在灵敏度换档时，不仅记录仪基线变，表头读数也会跟着变，实际上灵敏度换档对一个样品的浓度不会变化的，变的是记录仪峰值大小，浓度读数是恒定的。 鉴于看到市场上核酸蛋白检测仪存在种种问题，以及它们给科研工作者、给制药业等行业带来不利后果，也为了填补国内空白，我们决定试制颇有难度的双光束紫外检测仪。通过生化所专业技术人员两年的研发，新一代uv- detectorⅲ双光束紫外检测仪目前已推向市场，经各大院校、科研所、生物药业等单位应用证明，可达到lkb等进口仪器的同等效果。 二、双光束紫外检测仪与其它紫外检测仪的区别： 1、紫外光源 双光束紫外检测仪用的光源为无电极放电灯，该灯在国内为空白，在上只有瑞典lkb公司生产，该灯通过专业人员查资料查文献，不断试制*终获得成功。 2、线路设计 双光束紫外检测仪的光电转换器用光敏二极管，这是跟上时代步伐要求，省去高压以及高压带来影响仪器不稳定因素。在线路上采用双光束形式，一路为样品光束，另一路为参考光束，参考光束转换为电压后，用来产生反馈，抑制光源随温度变化而引起的变化，这样整个机器稳定，不会像单光束那样因温度等影响，一路慢慢漂移不止。 3、温度控制 灯室采用恒温控制。众所周知，一般光源都会随温度发生变化，采用恒温形式不仅能稳定光源，还会延长灯的寿命，而且也适合仪器在冷室中长期使用。 采用无电极放电灯，体积小，只有手指大小，起动灯源的供电部分用微波激发，整个激发光源板只有手掌大小，结构简单，功耗＜3w，该灯寿命长，理论上100,000小时，说明书上保守写2万小时，可以不关机长期连续使用，完全适合生化等领域长期监视， 双光束紫外检测仪特点： 1、仪器稳定时间短，开机后半小时内足以稳定。 2、仪器外壳设计防腐、防锈、美观、轻巧，市场上尚未见同类产品。 3、线路设计合理，除采用反馈等技术外，该仪器在改变灵敏度时，记录仪上的零点基线基本上保持不变，并且面板表上的读数不随灵敏度变化而变化，实验结果正确可靠。 4、因为光源采用无电极放电灯，各波长214nm、230nm、260nm、280nm、214nm、340nm等强度均匀，用滤光片取出波长，单色性好，不会给操作者、研究者等带来波长间互渗混乱效果。 与进口lkb公司仪器比较，我们采用了它们的技术，但又作了改进，像无电极放电灯，它们260nm、280nm要用2个滤光片，2个灯来获得，而我们只要用一个灯就可获得5个波长，这样可适应不同人需要，应用范围更广。进口仪器不设面板表，而我们采用面板表这样更直观，并随时从表头上获得监视样品信息，甚至仪器不接记录仪也可用，双光束紫外检测仪比进口仪器更稳定，尤其在高灵敏度区域内。