在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现犬肿瘤坏死因子α(TNFα)elisa酶联免疫试剂盒标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。

标本收集这个可*、*、*关键呀！一定不能忽视的哦。标本收集及保存的好坏，直接决定了实验能否成功。在收集标本之前必须考虑到实验对标本收集及保存的要求，这些要求对标本中待测物质稳定性影响很大。以ELISA为例。

犬肿瘤坏死因子α(TNFα)elisa酶联免疫试剂盒检测标本要求：

一般是液态标本，应在收集到新鲜标本后立即离心留取上清液1ml左右移入高温灭菌过的1.5ml EP管中。这种标本在4度保存48小时，-20度保存1个月，-80度保存6个月对检测影响不大。样本一般都是怕反复冻融的，这样会使蛋白降解，如需做预实验或需反复取用标本时，应在收集时即分装几个EP管。不注意这些要求，即使实验做的再漂亮也是瞎的，不大会出结果。

　　注意：ELISA试剂盒加标准品和样品时每次都要更换一个枪头，避免重复使用枪头而交叉污染；37度温育后千万不要忘记倒掉微孔板中的液体（包含未结合上的酶联亲和物，其残留必然造成假阳性），并且反复用稀释好的洗涤剂洗板；洗板可以多洗几次，没坏处；

　　洗板可用50ml或20ml注射器针管+1ml注射器针头抽洗涤液直接往微孔中冲洗，注意针头安牢，不然压力大时把针头冲到微孔里划到孔底，大量洗涤剂冲入就不好了。

　　ELISA试剂盒固化的抗体在底部，加样时枪头千万不要碰到底部；用不完整个试剂盒可以分开用，但分时一定不要摸底部，原因同前；

　　ELISA快速检测技术越来越多的用于疾病诊断、食品安全检测中，那么elisa试剂盒的主要组成成份是什么呢？根据ELISA试剂盒的应用范围，可将ELISA试剂盒分为哪几种？

　　完整的elisa试剂盒主要的组成成份如下：

　　1、已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)；

　　2、C的抗原或抗体(结合物)；

　　3、酶的底物；

　　4、阴性对照品和阳性对照品(定性测定中)，参考标准品和控制血清(定量测定中)；

　　5、结合物及标本的稀释液；

　　6、洗涤液，在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水；

　　7、酶反应终止液，常用的HRP反应终止液为硫酸，其浓度按加量及比色液的*终体积而异，在板式ELISA中一般采用2mol/L。

　　犬肿瘤坏死因子α(TNFα)elisa酶联免疫试剂盒常见问题：

　　1、食品安全检测ELISA试剂盒：是指食品中的激素、药物、霉菌毒素、过敏原残留、转基因产品的检测试剂盒，以及微生物、维生素等的检测产品。

　　包括植物病毒、细菌、真菌、植物激素和转基因作物的农业诊断试剂盒，以及动植物疾病诊断类如猪、牛、羊、马等家畜和禽类以及宠物类检测试剂盒。

　　2、生物原装ELISA试剂盒以及各类国产ELISA试剂盒

　　（1）细胞因子检测试剂盒

　　如白介素、选择素、集落刺激因子，肿瘤坏死因子，干扰素，转化生长因子，趋化因子，细胞因子受体，粘附分子，生长因子，凋亡因子等等

　　（2）心肌梗塞检测ELISA试剂盒

　　如肌钙蛋白，肌红蛋白，C-反应蛋白等等

　　（3）内分泌检测ELISA试剂盒

　　如甲状腺，胰腺，性激素，孕酮，睾酮，生长激素，生长抑素，内皮素，皮质醇，骨钙素，催乳素，促肾上腺皮质激素，促卵泡素，雌二醇，雌三醇，5-羟色胺，17-羟孕酮等。

　　（4）肝纤维化检测ELISA试剂盒

　　如纤维连接蛋白，透明质酸，胶原，基质金属蛋白酶抑制因子，基质金属蛋白酶，层粘蛋白等。

　　（5）自身免疫检测ELISA试剂盒

　　如甲状腺，盐水可提取核抗原抗体(ENA)，抗核抗体，DNA，抗心磷脂抗体，类风湿因子，循环免疫复合物，抗胰岛细胞抗体，胰蛋白酶原，Sm，大疱性类疱疮，蛋白酶，短膜虫法，肝-肾，肝-肾-胃，肌内膜抗体，角蛋白抗体，抗核抗体，抗核糖体蛋白抗体，抗聚角蛋白微丝蛋白抗体，抗链O，抗卵巢抗体，抗平滑肌抗体，抗线粒体抗体等。

　　（7）优生优育检测ELISA试剂盒

　　如早早孕，新生儿TSH，胎膜早破检测，抗子宫内膜抗体，抗心磷脂抗体，抗透明带抗体，抗卵细胞透明带抗体，抗卵巢抗体，抗精子抗体，巨细胞病毒，弓形体，风疹病毒，分娩预测，单核白细胞增多症，单纯疱疹病毒，促卵泡素，促黄体生成素，便隐血试纸，HCG等。

　　（8）传染病检测ELISA试剂盒

　　如幽门螺杆菌，乙脑，乙肝，丙肝，丁肝，戊肝，庚肝，衣原体，性病，腺病毒，微小病毒B19，天疱疮，水痘-带状疱疹病毒，生殖支原体，伤寒，沙眼，腮腺炎，人型支原体，麻疹，轮状病毒，流行性出血热，淋球菌，莱姆病，柯萨奇，抗解尿支原体，军团菌，结核，胶原，尖锐湿疣，甲肝，脊髓灰质炎，急性胰腺炎尿胰蛋白酶，霍乱，呼吸道合胞病毒，肝吸虫，副流感，肺炎，带状疱疹，传染性单核细胞增多症，层粘蛋白，布鲁氏杆菌，百日咳，白喉，艾柯病毒，EB 病毒，A族链球菌等。

　　（9）特种蛋白检测ELISA试剂盒

　　如免疫球蛋白，抗链O-aso，类风湿因子RF，C反应蛋白，微量白蛋白，β-2微球蛋白human，铁蛋白，转铁蛋白transferrin等。

　　（10）肿瘤标志物检测ELISA试剂盒

　　如肿瘤标志物，组织多肽抗原，肿瘤相关因子，胰腺癌，直肠癌，细胞角蛋白片段，胃肠癌，铁蛋白，糖链抗原，神经特异性稀醇化酶，上皮膜抗原，乳腺癌，人抗小鼠抗体，前列腺，甲胎蛋白，肝癌，大肠癌，肺癌，大小便隐血检测，癌胚抗原，β-2微球蛋白等。

常斤生物推荐ELISA试剂盒产品，主要包括：小鼠ELISA试剂盒、人ELISA试剂盒、马ELISA检测试剂盒、病原ELISA检测试剂盒、大鼠ELISA试剂盒、猪ELISA试剂盒、牛ELISA/EIA试剂盒。