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技术文章

革兰氏染色液的使用!

点击次数:15929 发布时间:2021/10/22 17:24:57

 革兰氏染色液的使用!
革兰氏染色法,是指细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法,属于复染法。过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌细胞壁较厚,肽聚糖网层次较多且交联致密,乙醇脱色时,肽聚糖脱水使孔径缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上,呈紫色。革兰氏阴性菌细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,脱色后类脂外膜迅速溶解,缝隙加大,结晶紫与碘复合物溶出,因此乙醇脱色后再经番红复染,呈红色。这种染色法是由丹麦医生革兰于1884年所发明。
产品名称:
革兰氏染色液
产品分类:微生物染色
产品规格:4x10ml /4x100ml /4x500ml
储存条件:室温,避光
产品组成:试剂(A): 结晶紫染色液   试剂(B): Gram碘液    试剂(C): 脱色液   试剂(D): 复红复染液
自备材料:
1、接种环或挑取细菌的其他工具
2、酒精灯
3、载玻片
4、光学显微镜
实验步骤(仅供参考)
1、涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者或在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与的水混合均匀,涂成一薄层。
2、干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。
3、固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动3~5次,每次1s,温度不宜过高,防止菌体蛋白变性,放置待凉后染色。也可以用甲醇或乙醇固定。
4、初染:滴加结晶紫染色液染色1~2min,清水冲洗去染色液;媒染:滴加Gram碘液,并覆盖载玻片,室温放置1~2min,水洗;脱色:滴加脱色液,摇动10~30s,直至流下的脱色液不出现紫色时为止,立即用水冲去脱色液,终止反应;复染:滴加复红复染液染色30~60s,水洗。
8、晾干多余水分,置油镜观察。
注意事项:
1.本产品仅供科研实验用,不做其它用途!
2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原创作者:南京信帆生物技术有限公司

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