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资料下载

植物可溶性糖含量试剂盒说明书

点击次数: 944发布时间:2011/3/7

  • 上 传 者: 南京信帆生物技术有限公司
  • 上传时间: 2018/4/4 11:02:25
  • 文件大小: 6KB
  • 文件类型: jpg
  • 所属分类: 其它资料
  • 下载次数: 332次
  • 查看次数: 944

资料简介: 测定意义:


糖类物质是构成植物体的重要组成成分,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。可溶性糖是指样品中的还原单糖及在本法测定条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解为葡萄糖的淀粉。

测定原理:

蒽酮比色法。可用于可溶性单糖、寡糖和多糖的含量测定,具有灵敏度高﹑简便快捷﹑适用于微量样品的测定等优点。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、沸水浴、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、浓硫酸(不允许快递)研钵、和蒸馏水。

试剂的组成和配制:
试剂一:粉剂×1 瓶,4℃避光保存;
试剂二:10mL×1 瓶 ,4℃保存;

样品中可溶性糖的提取:

称取0.1~0.2g 样本,加入1mL 蒸馏水研磨成匀浆,倒入有盖离心管中,95℃水浴10min(盖紧,以防止水分散失),冷却后,8000g,25℃离心10min,取上清液于10ml 试管中,用蒸馏水定容至10mL,摇匀备用。

测定步骤

1、分光光度计或酶标仪预热30min 以上,调节波长至620nm,蒸馏水调零。

2、调节水浴锅至95 度。

3、工作液的配制:在试剂一中加入2.5mL 试剂二。充分溶解后使用,如较难溶解,可加热搅拌;用不完的试剂4℃保存一周;

4、加样表(在EP 管中反应):

试剂(μL) 空白管 测定管
样本                        40
蒸馏水           80      40
工作液           20      20
浓硫酸           200    200
混匀,置95 度水浴中10min(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温后,取200 uL 转移至微量石英比色皿或96 孔板中,于620nm 处,分别读取空白管和测定管吸光值,ΔA=A 测定管-A 空白管。

注意:

1、空白管只要做一管。

2、如果ΔA 大于1,需要将样本用蒸馏水稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数。

3、由于浓硫酸具有强腐蚀性,请谨慎操作。

注意:检测限为1mg/g 鲜重或10ng/ mg prot

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