促黄体生成激素检测试剂盒,信帆生物放免代测更省心!
促黄体生成激素(LH)放免药盒 [使用目的]
用于定量测定人血清(或血浆)中促黄体生成激素(LH)的浓度。
[用途]
促黄体生成激素(LH)是垂体前叶分泌,有两条多肽链通过共价键结合的糖蛋白激素,分子量为 30000,参与性腺内分泌功能调控。对女性,在月经中期 LH 达到高峰时促成排卵,促进卵泡变为黄体,促进间质生长和孕酮合成;对男性,促进睾丸 Leydig 间质细胞分泌睾丸酮,协同 FSH 促进精子形成。促黄体生成激素(LH)的测定是判断下丘脑-垂体-性腺轴功能的常规检查方法,在预测排卵时间、绝经期和不孕症的诊断和内分泌治疗方面,具有重要意义。
本品采用了第二抗体+聚已二醇沉淀法放射免疫分析试验原理:含促黄体生成激素(LH)的样品和 125I 标记的促黄体生成激素(LH)与相应的抗体反应形成抗原抗体复合物。反应后加入二抗及 PEG,使免疫复合物沉淀,离心,测沉淀放射性计数。通过标准曲线得到样本中促黄体生成激素(LH)的浓度。
[试剂主要组成成分]
1、 LH 标准品:一套共 7 瓶,以不含 LH 的人血清为基质,用时轻轻摇匀,需冷存。LH 标准品浓度
A B C D E F G (单位) 0 5 10 25 50 100 200 mIU/mL
本 药 盒 标 准 品 浓 度 采 用 WHO 2ndIRPHMG, 与 WHO 68/40 的 换 算 关 系 为 :
mIU/ml[2ndIRPHMG]×0.65=mIU/ml[68/40]
2、 质控血清:两瓶,1.0ml/瓶
浓度为:L:11.05±2.79 mIU/ml H:22.53±7.31 mIU/ml
3、抗 LH 抗体: 一瓶,绿色溶液,2~8℃冷存。
4、 125I-LH: 一瓶,< 88.23 kBq/瓶,红色溶液,2~8℃冷存。
5、 分离剂: 两瓶,蓝色溶液,充分摇匀后使用,2~8℃冷存。
样本收集和保存:
220 微升人血清样本。采静脉血 5ml 于塑料试管中,静置使其凝固后,1500 转/分离心,取其上清液,放置玻
璃瓶中。如果样本不立即使用,可在-18℃~-25℃储存 6 个月。
重溶血、高浓度的脂类、胆红素对测定结果有影响。
[使用前准备]
试验前,恢复样本至室温,小心摇匀血清样本。
[实验方法]
操作方法 I 1、 将实验所需试剂及样本放置室温,平衡至少 30 分钟以上才可进行操作;
2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管进行编号,所有实验均做双管重复;
3、 取每个浓度的标准品、质控血清和样本 200µl 加入相应编号的试管中;
4、 每管均各加入 200µl 抗体工作液;
5、 37℃温育 0.5 小时;
6、 每管均各加入 200µl 标记工作液,充分混匀;
7、 37℃温育 1.5 小时;
8、 每管均各加入 500µl 分离剂后,充分混匀;
9、 室温放置 5~10 分钟后,离心 3500 转/分,20 分钟后,吸去或倾倒掉上清液; 9、用 γ-计数器测定各管计数CPM. 推荐检测时间: 1 分钟
10、 从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度。
[质量控制]
每次实验操作应至少采用两个浓度的质控血清进行质量控制,以确保每次实验测定结果的可靠性。
1、 质控血清的平均值应在允许范围内;
2、 曲线方程应采用*佳拟合方式;
3、 重复样本的测定结果相差在 15%以内。
如不能同时满足以上条件,则此次试验结果无效,全部试验需重新进行。
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