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文章标题《人脐带间充质干细胞对急性肺损伤大鼠的血清炎性因子及肺组织TRB3 mRNA表达》


摘要：为了研究人脐带间充质干细胞对急性肺损伤大鼠的血清炎性因子及肺组织TRB3 mRNA表达的影响。我们将60只成年SD大鼠分组造模后,治疗组予以气管内滴注人脐带间充质干细胞悬液治疗。用ELISA法测定三组肺组织白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TGF-α)水平,实时荧光定量PCR检测肺组织TRB3 mRNA表达量,称量计算大鼠肺组织湿/干质量比。研究发现应用干细胞治疗后,肺组织内IL-6、IL-10、TGF-α水平显著降低,TRB3 mRNA表达量也降低,肺组织湿/干质量降低,水肿明显缓解。说明人脐带间充质干细胞可有效降低急性肺损伤大鼠的血清炎性因子及肺组织TRB3 mRNA表达水平,并减少肺组织湿/干质量比。

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操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.  待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；

4.  随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。