关于ELISA实验和生化检测样本准备要求和说明
项目介绍
1. 酶联免疫(ELISA)检测
利用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应定量目标抗原或抗体含量。此方法灵敏度高,特异性强,适合多种分泌型蛋白及细胞因子的测定。
2. 生化检测
适用于血清蛋白质,常见酶类,体内小分子代谢产物的测定。比如手动生化抗氧化指标SOD,MDA,GSH-PX等。优点:检测面广,可检测动物血液组织,各种体液。上机生化:肝肾功能,血脂血糖等。优点:应用全自动生化分析仪检测,大样本盘,反应恒温,有标准品和质控品,结果准确,检测迅速。
3. 全自动动物血细胞分析
多达13 种动物检测模式,可检测21 项参数, 全自动操作, 细胞信号全数字化处理技术,每种动物设有各自独立的专用测量系统 。
生化样本准备方法及要求:
以下所有样本必须尽量新鲜!
1、动植物组织样本(干冰运输)
准确称取动物组织重量按重量(mg):体积(μL)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.9%的生理盐水),冰水浴条件下,研磨仪匀浆,制备成10%的匀浆液,2500~3000rpm/min,离心10min,取上清液进行测定。
2、血清样本(干冰运输)
全血标本请于室温放置2h内或4℃过夜后于4℃ 3000rpm/min离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。
3、血浆样本(干冰运输)
1.生化、ELISA:可用肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于4℃ 3000rpm/min离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。
2.凝血四项:抽取静脉血,按照9份静脉血、1份抗凝剂的比例加入到3.8%(或3.2%)的枸橼酸钠抗凝管中,轻轻颠倒10次使之充分混匀,不得有凝块,不得形成泡沫。
3.采样后应尽快分离血浆(60分钟内进行),将标本以3000rpm/min离心10-15min,使血浆分层,取上层血浆。
4.分离后的血浆-20℃以下密封可保存2周。干冰运输。
4、细胞样本
贴壁细胞:将细胞用PBS冲洗2次后,用细胞刮将细胞小心刮下来,将培养液3000rpm/min,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
悬浮细胞:将培养液3000rpm/min,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
细胞上清:标本于4℃,3000rpm/min离心15min取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。
5、全血样本(4℃运输)
EDTA抗凝管取适量抗凝全血。EDTA与血液*佳比例为1.5mg:1mL,样本量不可太多或太少,取样后上下轻轻颠倒几次使血液与抗凝剂充分混匀。4℃运输,不可与冰袋直接接触,不可猛烈撞击。抗凝全血仅用于血常规检测,不可运输后再离心取血浆。