微生物是一群个体微小的生物，一般肉眼不能直接观察，通常利用培养基（人工配制的适合微生物生长发育的基质）在适宜的条件下，促使其迅速增殖而形成群体结构即菌落来进行观察计数或要借助一定倍数的显微镜进行观察。微生物是自然界中一群个体微小，结构简单的低等生物的总称。它包括不具细胞结构的病毒；属于原核生物的细菌、放线菌、蓝绿藻、立克次氏体、衣原体；属于真核生物的酵母菌、霉菌、单细胞藻类和原生生物。大多数微生物是对人体无毒害的，它不会引起人类、动物或植物的病害，但是有多种微生物能引起人类疾病，其中有25种能通过食品传染，有5种可引起食品中毒。

灭菌与消毒

灭菌是应用物理的或化学的方法杀死物品上或环境中的所有微生物。灭菌后的物品处于无菌状态。

消毒是应用物理的或化学的方法杀死物体上绝大部分微生物（特别是病原微生物）物品经消毒处理后，虽仍有少数微生物未被杀死，但已不致引起有害作用，故消毒实质上是局部灭菌。

在微生物实验、生产、工作中，需要进行纯培养，要求不能有任何杂菌，因此，对所用器皿、培养基均需要进行严格的灭菌，工作场所也应消毒，才能保证工作顺利进行。

我们常用的灭菌、消毒方法有：高温灭菌法、紫外线灭菌、化学药剂消毒灭菌。

（一）   高温灭菌法

 原理：高温可使细胞原生质变性而失去生命力。

1．            火焰灭菌法：直接用火焰烧灼的灭菌。此法迅速彻底，对于接种环，接种针等金属用具，可直接在酒精灯外焰上烧至红热进行灭菌，在接种的过程中，试管或三角瓶口，也采用通过火焰达到灭菌的目的。沾污了病菌的残渣、废纸等用火烧掉，都属于火焰灭菌法。

2．            干热灭菌法：利用干燥热空气杀灭细菌，常用于玻璃器皿（如吸管、培养皿等）、金属用具的灭菌，一般地采用150℃维持2h或160℃维持1h即可，盛装玻璃器皿的铜筒，筒加热时即将两孔对齐，灭菌结束取出时，将两孔错开，使铜桶密闭。

3．            煮沸灭菌法：严格讲此法算消毒作用，常用煮沸灭菌法来处理污染了菌类的瓶子、用具等将其煮沸30min左右杀死大部分菌后才能洗刷。

4．            高压蒸汽灭菌：其在密闭的高压蒸汽灭菌器中进行，原理是在密闭的环境下，蒸汽的温度随压力的增加而提高，压力越大，温度越高，从而达到灭菌的目的。

我们实验室目前用的是手提式灭菌器，其使用方法及注意事项为：

①    在灭菌锅内加入足量的蒸馏水，将灭菌的物品疏松的放入锅内，切不可挤的太满，以免阻碍蒸汽流通，影响灭菌效果，然后加盖并按对角拧紧螺栓，打开放气阀；

②    接通电源加热，待锅内的水沸腾有大量的蒸汽冲出时，保持3-5min，使灭菌锅内冷空气完全排出，关闭放气阀，此后压力逐渐增高至所需压力（或温度）时开始记时，维持时间根据灭菌物品的要求确定。

③    灭菌结束后，关闭电源，让压力自然下降，切不可突然放气降压，以免引起培养基、无菌水暴沸，污染棉塞，待压力降至“0”后，方可打开灭菌锅盖，快速取出灭菌物品。

（二）   紫外线灭菌

紫外线对微生物有强烈致死作用，波长在260nm左右的紫外线杀菌力蕞强。杀菌机制是短波的紫外线引起细胞蛋白质和核酸发生光化学反应。紫外线穿透力很弱，普通玻璃、薄纸、水层等均能阻止其透过，故紫外线只限于物体表面或接种室的空气灭菌，接种室安装一支30W灯管，约可照射9M³空间，照射前可喷洒石炭酸、煤酚皂溶液等化学消毒剂以加强灭菌效果，一般照射30-60min即可。

紫外线对眼粘膜及视神经有损伤作用，对皮肤有刺激作用，所以不能在紫外线灯下工作，必要时须穿防护衣帽，并戴有色眼镜。