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细胞爬片-滴片
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详细内容
爬片又名细胞爬片,是指让玻片浸在细胞培养基内,细胞在玻片上生长,主要用于组织学,免疫组织化学,bing冻切片,细胞涂片,原位杂交等。
1、爬片前期处理:
①爬片固定:在孔中滴加3ml固定液,固定15min。吸净孔中固定液,纯水水洗3次(每次水洗的时候用尖头镊子挑起爬片清洗,然后用吸管吸净纯水,β半乳糖染色使用专用的固定液。)
②爬片破膜:在孔中滴加3ml破膜液,破膜15min。吸净孔中破膜液,纯水水洗3次(每次水洗的时候用尖头镊子挑起爬片清洗,纯水不吸出,留着后续使用)
(针对六孔板,其它孔板滴加适量的固定液和破膜液。)
2、爬片染色:
后续染色步骤同石蜡切片相同,染色时间适当延长,清洗或者更换染液使用巴氏吸管吸净之前的染液。
3、爬片封片:
加入适量酒精或水(看染色过程中*后一步是使用水还是酒精)后挑起爬片,爬片靠在孔边缘,吸净酒精后放置于65℃烤箱烘干15min。(染色过程中注意细胞爬片的方向,保证细胞面朝上和染液充分接触)
从烤箱中取出装有爬片孔板,在载玻片上写下每个孔板的编号,在载玻片上滴加一滴中性树胶后,用镊子夹起对应编号的爬片,细胞面朝下封片。(封片过程中注意细胞爬片的方向,保证细胞面朝下封片)
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