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大鼠白介素12 p35(IL-12 p35)elisa试剂盒白细胞介素即是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子。
目前至少发现了38个白细胞介素 ,分别命名为IL-1~IL38,功能复杂,成网络,复杂重叠;在免疫细胞的成熟、活化、增殖和免疫调节等一系列过程中均发挥重要作用,此外它们还参与机体的多种生理及病理反应。
免疫系统细胞的增殖、分化和功能受到一系列细胞因子的调节。根据细胞因子的结构同源性可将其分为几个蛋白质家族,如IL-1家族、IL-6家族、IL-10家族、肿瘤坏死因子家族和造血因子家族等。白细胞介素穿插归类为其中。
白细胞介素-12(IL-12)是具有广泛生物学活性的细胞因子,主要由激活的炎性细胞产生。
IL-12是一由p35和p40(IL-12β)两条链组成的异源二聚体,两个亚单位通过二硫键连接在一起,这种结构在目已发现的IL中所罕见。通常情况下,p40的量远超出p70,在鼠中已观察到p40同源二聚体的产生,是由转染的细胞分泌的,p40同源二聚体没有生物学活性,但它能和IL-12Rβ结合,与p70竞争性争夺IL-12受体(IL-12R)而拮抗其生物学作用。单独的p35不具有生物学活性,但却是合成p70的限速因子。
IL-12受体由IL-12Rβ1和IL-12Rβ2组成,两链激活JAK-STAT(连接蛋白-信号转导子和转录激活子)信号转导通路,IL-12独特的细胞效应主要是由于STAT4的活化,由以下事例证明:遗传上STAT4基因缺陷鼠和IL-p40缺陷鼠有同样的表型。IL-12R主要由活化的T细胞、NK细胞、DC细胞和B细胞表达。
IL-12主要由B细胞和巨噬细胞产生;其分子是一种异型二聚体,40KD(p40)和35KD(p35)的2个亚基通过二硫键相连接。
功能:IL-12主要作用于T细胞和NK细胞,曾被命名为细胞毒性淋巴细胞成熟因子(CLMF)和NK细胞刺激因子(NKsf)。IL-12可刺激活化型T细胞增殖,促进TH0细胞细胞向TH1细胞分化;诱导ctl和NK细胞的细胞毒活性并促进其分泌IFN-γ、TNF-α、GM-CSF等细胞因子;促进NK细胞和IL-2rα、TNF受体及CD56分子的表达,增强对肿瘤细胞的adcc效应。
白介素 12是由单核 /巨噬细胞及B淋巴细胞产生的一种异源二聚体分子 ,合成受多种因素影响 ,其具有多种生理及病理功能 ,可用于感染、肿瘤、自体免疫性疾病等的治疗。
大鼠白介素12 p35(IL-12 p35)ELISA试剂盒
因已定位于人染色体 5q31 ~ q33 , 该区域编码一系列细胞因子 与细胞因子受体。编码人 P35 的基因已定位于人染色体 3p12 P40 和 P35 的基因与人的这些基因分别具有 70 %~ 60 %的序 列同源性。利用 Sout hern 杂交分析人 IL212 基因组 DNA 发 ~3q1312. 编码鼠 P40 和 P35 的基因尚未精确定位 . 编码 P40 及 P35 的基因极有可能是单拷贝基因 。
首先是由美国 的 Wistar 从 EB 病毒转染人 B 淋巴母细胞系 RPMI28866 的培 养液中发现的 ,将其命名为 N K 细胞刺激因子 ( N KSF) ,随后 是由 Hoffman 研究小组从 EB 病毒转化的 B 细胞系 NC37 培养 液中鉴定到 ,并命名为细胞毒淋巴细胞成熟因子 ( CL MF) 待 完全纯化了两者并克隆基因后 ,发现 N KSF 和 CL MF 是同一种 细胞因子 ,并定名为 IL212 基酸组成 ,包含 10 个半胱氨酸残基和 4 个潜在的糖基化位点 , 轻链 ( P35) 由 197 个氨基酸组成 ,包含 7 个半胱氨酸残基和 3 个 潜在的糖基化位点. 单独将 P35 或 P40 的 cDNA 转染 Cos 或 CHO 细胞后均只能得到对应的单条链 ,只有共转染才能得到生 物活性的 IL212 ( P75 异源二聚体) . 种间杂合的 IL212 异源二聚 体 ,若 P35 来自鼠 ,则对人和鼠淋巴细胞均有效应 ,若 P35 来自 人 ,则不论 P40 来源如何 , 都只对人淋巴细胞有效应 , 故 IL212 的种属特异性取决于 P35 亚基的差异 . IL212 的 P35 与 P40 亚基之间无序列的同源性 , 但 P35 亚 基与 IL26 , G CSF 以及鸡骨髓单核细胞细胞生长因子有一定的 2 序列同源性 ,并且与许多细胞因子一样 ,有α 2螺旋丰富区 . P40 亚基与 其 他 细 胞 因 子 无 序 列 同 源 性 , 却 与 促 红 细 胞 生 成 素 ( hemopoietin) 受体超家族的 IL26 受体α 2亚基和睫状神经营养 IL2 是 一 种 M r 75 000 的 糖 蛋 白 , 由 M r 4 000 和 M r 12 35 000两个亚基组成异源二聚体 . 其重链 ( P40 ) 是由 306 个氨 胞 ( 包括 CD4 + 和 CD8 + ) T 细胞 , 还有 IL22 或激活的 N K 细胞 上 , IL212R 的表达可被 IL212 上调 . IL212R 由两条多肽链β 和 1 β 组成 ,均符合 B 型细胞因子受体的特点 . IL212 信号转导实 2 验模型显示 β 亚单位可与 Janus 激酶家族21 (JA K2 ) 相互作用 , 1 β 亚单位与信转导转录激活因子 3 和 4 ( STA T3 ,STA T4 ) 以及 2 cDNA 已被克隆 ,并利用基因工程表达技术获得与天然 IL2 基因全长约 20 Kb至少有 5 个外显子 ,其 cDNA 全长约 2136 Kb , 编码 328 个氨基酸多肽 , 并具有一长 113 Kb的 3 非编码区 , 内 分二部分 ,部分由 A T G 开头 ,共34 bp ,为起始密码 ,第二部 分也由 A T G 开始 ,共 22 bp , 是信号肽序列 , 该序列的存 非编码区 ,其内富含 A TTTAmRNA 非稳定序列。
大量实验证明 P40 和 P35 基因均定位于人类基因组内 , 而不在 EB 基 因组内 ( IL212 以往大多是从 EB 转化的 B 细胞株中获得 )。P40 含单拷贝的 AL U 重复序列及多拷贝的 A TTTAmRNA 稳定序 列 ,该序列常见于多种细胞因子 mRNA 中。P35 结构基因全长 如单核巨噬细胞 ,*近又发现人角质形成细胞及其细胞系和脂 一系列的诱导物后会大幅度提高 ,这些诱导物包括金黄色葡萄 球菌 ,死的结核分支杆菌 ,利什曼原虫 ,弓形虫 ,麻风分支杆菌 , 流式细胞仪分析表明 ,在静息的人 N K 细胞上有 IL212R , IL212 产生细胞是抗原提呈细胞 ,B 细胞产生 IL212 的能力远不 IL212 是由两个研究小组各自独立发现的。
目前 ,在 IL212 基因研究的基础上 ,编码 P40 和 P35 亚单位 多糖刺激的人多形核细胞也能产生 IL212. 在培养小鼠骨髓细 胞中加入肥大细胞 ( mast cell) 生长因子后 ,也有 IL212 两个亚基 的转录 . 人外周血单个核细胞 ( PBMC) 产生 IL212 的量在加入 β γ GM2 GSF , IFN2 和 TFN2 时 ,均不能增加 IL212 分泌量 . IL212 的生物活性是专一性的 ,高亲和力的受体 IL212R 介 6 Kb ,其 cDNA 长约113 Kb , 编码 253 个氨基酸多肽 , 其信号肽 在已足以使 P35 亚单位表达 , P35 cDNA 也具有一 450 bp 的 3 ’ 细菌超级抗原等等 。当在 PBMC 培养液中加入佛波酯或许 α β α β 多种细胞因子 ,如 IL21 , IL21 , IL22 , IL24 , IL26 , TN F2 , TN F2 , 而在静息的人 T 细胞 ,单核细胞以及活化的 B 细胞上均检测不 到 IL212R. 在丝裂原或同种异型抗原 ( alloantigen ) 激活的 T 细 γ 12 具有相同生物活性的重组 IL212 ( IL212 )。机体中主要的 T YK2 相互作用 。
大鼠白介素12 p35(IL-12 p35)ELISA试剂盒