白介素-1β刺激人眼球后成纤维细胞表达和分泌RANTES的实验研究

1.IL一1β 可以激活即使其大量表达并合成趋化因子RANTES，这可能是GO 眶内组织中淋巴细胞浸润的主要原因。

2.IL一1β 刺激RF合成的RANTES，具有明显的生物学活性，对PBL有较强的趋化作用，因此，RANTES可能是GO中引起淋巴细胞浸润眶内组织的主要因子。

3.IL一1β 诱导RF合成RANTES的作用，可能是通过活化转录因子NF一出所致。

白介素-1β重组蛋白是在大肠杆菌中重组表达的，是一条非糖基化的多肽链，包含有153个氨基酸，分子量为17000Da.该人白介素-1β重组蛋白*终由标准的色谱技术纯化出.

白介素-1β （IL 1 beta）冻干粉末在室温可保存3周，或置于-18℃冻存用于长期保存.重新溶解后可以在4℃冷藏保存至少2-7天；如果想延长保存时间，建议分装（加载体蛋白如0.1% HSA或 BSA）后置于-18℃冻存.请避免反复冻融。

白细胞介素-1（interleukin-1，IL-1）是在感染和炎症状态下，由多种细胞产生的、有多方面生物学功能的细胞因子，其生物学作用十分广泛，主要包括参与介导炎症反应、调节免疫、调节机体代谢.IL-1分子重量为17.5KD，有两种类型：IL-1α和IL-1β，主要以IL-1β为主.IL-1受体（interleukin-1 receptor，IL-1R）包括Ⅰ型和Ⅱ型，此外还存在一种内源性IL-1受体拮抗剂 （interleukin-1 receptor antagonist，IL-1ra或IL-1γ），IL-1ra可以与IL-1受体结合，但是不引起相应的作用.炎症情况下，粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF） 水平升高，它也能促进IL-1 的上调作用，增加IL-1β的合成；另外关节滑膜细胞也可自分泌IL-1β.
大鼠白介素1β(IL-1β)elisa试剂盒

注意事项
1.血清标本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，如为有菌操作，则建议冰冻保存。样本的长时间保存，应在-70℃以下。
2.在使用微量加样器时，吸取不同瓶子中液体后要更换枪头，即使吸取标准品溶液。
3.吸取液体时速度不易太快，以免产生气泡，吸取的量不够准确。
4.样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二则一些细菌的内源性酶，如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。1．5 吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸，减少误差。
5.液体全部加入酶标孔后，将酶标板放在桌子上平行轻轻摇晃30s，使液体充分混合均匀，也使其得到充分的反应。
6.孵育时要使盖板膜封好酶标板，防止水分蒸发，以防曲线不成线性。
7.实验前30min将试剂盒中的所有试剂从冰箱取出，使试剂盒中的所有试剂与提取好的样品溶液的温度相同，酶标板只要取出所需量。
8.由于底物显色剂对光及其敏感，因此要避光保存。
要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的ELISA测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色
9.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15～30s，不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中，防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
10.检测吸光度前应将酶标仪打开，将其预热30min以上。
11.底物为TMB，避免与皮肤相接触。终止液为2tool的浓硫酸具有腐蚀性，应尽量避免接触皮肤。
12.孵育的时间应该严格按照试剂盒说明书上的时间为准。
13.要尽量做双孔实验，这样才既能保证数据的准确性，又能反映出试剂盒的精密度。
14.冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用，从而引起假阴性结果。此外，冻融标本的混匀亦应注意，不要进行剧烈振荡，反复颠倒混匀即可。
15.对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。
16.没有去离子水或双蒸水时，可以使用娃哈哈纯净水配制溶液，切勿使用自来水。
17.标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时，应离心沉淀后取上清检测。