与Southern Blot或Northern Blot杂交方法类似，但Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。


经过PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。

 

western blot一般步骤：蛋白质抽提，蛋白质定量，变性聚丙稀酰胺不连续凝胶电泳（SDS-PAGE），蛋白质转移，western blot膜的封闭和抗体孵育，western blot结果检测，western blot数据分析，提供实验报告。

western blot服务内容：专业的队伍，提供完整的实验步骤和结果，提供专业的数据分析，提供电子版扫膜结果，以及灰度值分析。

 

Western blot样本要求

客户需新鲜或正确保存的蛋白样品， 检测目的蛋白的一抗（或由本公司代购）。样品要求为：

1、裂解样品总蛋白量>500ug/样品。

2、细胞样品总蛋白浓度>1mg/ml。

3、组织样品总蛋白浓度>10-15mg/ml。

 

Western blot结果及数据提供

内参蛋白和目的蛋白曝光胶片各一张，可提供扫描图，实验报告，包括整个试验流程所涉及的实验数据和实验步骤。如需进行蛋白纯化服务，将提供检测报告

WB实验代测

服务内容

我们提供从蛋白制备、蛋白电泳到Western blot检测的全流程服务，如需要还可进行灰度分析。

说明

1、建议提供目的蛋白阳性表达样品（纯蛋白或有阳性表达的细胞或组织）作为阳性对照。

2、每张膜检测1-8个样品。

3、如果一抗由客户提供，请在正确条件下保存，避免污染及反复冻融。

关于Western blot实验异常分析

『无信号』

『没有特异条带』

『条带大小不正确』

尊敬的客户：
本公司有放射免疫技术服务、蛋白质组学服务、免疫组化、PCR技术服务、生物信息学数据分析等，如果您想了解Western blot的更多内容或者其他服务信息，您可以拨打本公司的服务热线了解更多产品的详细信息，至善至美的服务是我们永无止境的追求，欢迎新老客户放心选购自己心仪产品，我们将竭诚为您服务！

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