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大鼠赖氨酰氧化酶(LOX)elisa试剂盒
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产品名称: | 大鼠赖氨酰氧化酶(LOX)elisa试剂盒 | ||||||
英文名称: | Rat LOX (Lysyl Oxidase) elisa Kit | ||||||
规格: | 48T/96T | ||||||
保存: | 2-8度保存 | ||||||
用途: | 科研使用,请勿用于临床诊断 | ||||||
1、要确保微量加样器的准确性,可以使用蒸馏水和电子天平进行确定(由于蒸馏水不含杂质,温度环境为20℃左右时,1ml的水可以看作是1g,200ul的水可以看作是0.2g),每一把微量加样器都应该将其量程和量程进行确定。 2、在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。 3、吸取液体时速度不且太快,以免产生气泡,吸取的量不够准确。 4、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头的液体和孔壁接触,液体会自然流下去。吸入液体时的方法是吸两档打一档,防止由于枪头的毛细作使得部分液体不能流出而造成误差。 5、吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。 6、液体全部加入酶标孔后,将酶标板放在桌子上平行轻轻摇晃30s,使液体充分混合均匀,也使其得到充分的反应。 7、孵育时要使盖板膜封好酶标板,防止水分蒸发,以防曲线不成线形。 8、实验前半个小时将试剂从冰箱中取出,使试剂盒中的所有试剂与提取好的样品溶液的温度相同。(酶标板只要取出需要量) 9、手工洗板时每次加入洗涤液后,应静置15-30s,不要将一个酶标孔中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。 10、检测吸光值前应将酶标仪打开,将其预热30min以上。 11、底物为TMB,避免与皮肤相接触。终止液为2mol的浓硫酸,具有腐蚀性,应尽量避免接触皮肤。 12、孵育时间应严格按照试剂盒说明书上的时间为准。 13、不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同,所以务必按照所用试剂盒严格操作,否则容易产生检测结果的不确定性。且同一厂家不同批次的产品也不能交叉使用。 | |||||||
大鼠赖氨酰氧化酶(LOX)elisa试剂盒 | |||||||
问题:实验操作中显示和比色的注意事项? 答:TMB 经 HRP 作用后,约 40 分钟显色达顶峰,随即逐渐减弱,至 2 小时后即可完全消退至 无色。TMB 的终止液有多种,叠氮钠和十二烷基硫酸钠(SDS)等酶抑制剂均可使反应终止。 这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24 小时)不褪,是目视判断的良好终止剂。此外, 各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色,此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。 | |||||||
问题:请问样本应该如何保存? 答:一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG聚合,使间接法的试剂本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测 抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。 | |||||||
问题:标本有溶血应该怎么办? 答:大部分 ELISA 检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红 细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以 HRP 为标记的 ELISA 测定中,溶血标本 可能会增加非特异性显色。轻微溶血问题不大,如果溶血太严重建议老师重新收集样本。 | |||||||
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