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番红-固绿染色(软骨)实验
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详细内容
番红-固绿染色(软骨)实验代测
在涉及关节软骨及软骨下骨的形态学研究中,常需联合使用多种染料以显示其组织学结构。其中,起源于上世纪60年代的番红O(safranin O)-固绿(fast green)染色因可以直观反映关节软骨、软骨下骨和骨组织的结构而备受青睐。
服务说明
番红固绿染色实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。
2、番红染色:切片入1%番红染液染色1-2h。自来水稍洗,洗去多余染料。
3、脱色:入50%,70%,80%梯度酒精脱色各5-10s。
4、固绿染色:切片入0.5%固绿染液中染色5-10s。无水乙醇I中脱色30s,无水乙醇II中脱色1min。
5、封片:切片于60℃烤箱烤干后于二甲苯透明5min,中性树胶封片。
6、显微镜镜检,图像采集分析。
番红-固绿染色(软骨)实验代测
注意事项
1、 片子染色不好需要重新染色时,可以用自来水浸泡去除固绿颜色,盐酸酒精浸泡去除番红颜色。2、 番红鲜红色除了软骨外其他有些地方的红色也较深。一旦番红着色深后再染固绿染不上,需进将番红红色全部脱掉后重新染方可。
3、 染色时间稍有差异红色和绿色的差异就会很大,要注意镜下控制两种颜色的程度。
4、 番红染次数多了会产生沉淀且不易着色,需及时更换染液。
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