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细胞增殖及毒性检测试剂 底价供应
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详细内容
细胞增殖及毒性检测试剂 底价供应 | |||||||
产品名称: 细胞增殖及毒性检测试剂 | |||||||
其它名称:Cell Counting Kit-8 | |||||||
英文名称:Polysciences Polyethylenimine HCl MAX, Linear, Mw 40,000(PEI 40,000) | |||||||
CAS号:N/A | |||||||
规格:1g | |||||||
分类:细胞增殖和毒性检测 | |||||||
储存条件:请参照产品标签 | |||||||
Cell Counting Kit (CCK-8),中文名CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂,简称CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8(化学名为2-(2-甲氧基-4-硝本基)-3-(4-硝本基)-5-(2,4-二磺基本)-2H-四唑单钠盐)的一种广泛应用于细胞增殖和毒性检测的快速高灵敏度试剂盒。 WST-8是MTT(噻唑兰)的升级产品,检测原理(见下图)为:在电子耦合试剂存在的情况下,WST-8可被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物(formazan)。颜色的深浅与活细胞数量(细胞增殖)成正比,与细胞毒性成反比。通过酶标仪在450nm波长处测定OD值来反映细胞增殖,以及细胞毒性水平。 保存:2-8℃避光保存,一年有效。-20℃避光保存,二年有效。 1) 首次做实验时,建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。 2) 接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来导致每孔中的细胞数量不等,可以每接种几个孔就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发,为减少误差,建议培养板的四边每孔只加培养基,而不作为指标检测孔。 4)有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔间的差异。加入CCK-8试剂时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,会干扰OD值读数。 5)加CCK-8速度要快,减少试剂在移液器上的残留。为使CCK-8试剂和培养基充分混匀,建议在加入CCK-8后轻轻震摇培养板。为了避免加样时由于CCK-8在枪头上残留所引入的误差,可以在加样前用培养基稀释CCK-8并混匀后加样。 6)CCK-8的核心成分WST-8会与还原剂反应生成WST-8甲臢,若实验体系内含有还原剂,请务必检测背景OD值(即在不含细胞的培养基中加入药物,然后加入CCK-8在一定时间内检测)和不加药物的培养基(只加CCK-8)进行比较。如果OD值明显偏高,则说明的确存在反应。 8)如果样品为高浑浊的细胞悬液,建议设定600nm(或600nm以上)作为参比波长,扣除参比波长的OD值即可。 9)CCK-8对细胞毒性非常低,其与活细胞脱氢酶持续反应使溶液颜色不断加深,OD值不断增加(由于脱氢酶是持续产生的)。另外,其他实验比如中兴红法或结晶紫法,也可在CCK-8检测完成后继续进行。 | |||||||
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