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细胞直接PCR裂解液 底价供应
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详细内容
细胞直接PCR裂解液 底价供应 | |||||||
产品名称: 细胞直接PCR裂解液 | |||||||
其它名称:细胞直接PCR裂解液 | |||||||
英文名称:Polysciences Polyethylenimine HCl MAX, Linear, Mw 40,000(PEI 40,000) | |||||||
CAS号:N/A | |||||||
规格:1g | |||||||
分类:细胞直接PCR | |||||||
储存条件:请参照产品标签 | |||||||
1)省时:更少的动手时间;尾巴裂解液粗提物即可用于PCR; 2)省钱:仅需成本的反应流程; 3)安全:无有机试剂; 4)环保:更少消耗(有机试剂,管子,枪头等等) 5)可靠有效:100%成功率保证高产量 2)85℃孵育45min; 3)取1μl裂解液进行PCR基因型研究。 1)10cm细胞培养板细胞,使用添加新鲜制备的0.2-0.4mg/ml蛋白酶K的200-300μl DirectPCR®Lysis Reagent (Cell) 细胞裂解液重悬细胞。蛋白酶K在DirectPCR®中稳定保存~24h。如果处理少量细胞,会很难称量蛋白酶k粉末,可直接使用Viagen提供的基因组PCR级的蛋白酶K溶液(Cat#501-PK),使用浓度为0.5-1.0mg/ml(每1ml DirectPCR®中加入25-50μl蛋白酶K溶液)。【注意】:若使用小量细胞,可用去离子水稀释DirectPCR®高达10倍,然后使用合适更多体积的裂解液用于PCR。见表1,DirectPCR®Lysis Reagent (Cell)起始使用条件。 3)水浴锅内85℃孵育粗提液45min。【可选】于步骤4)前离心10s沉淀毛发。粗提液可置于-20℃保存1年(或4℃保存1周),不会降低效率。 4)每50μl PCR反应体系加入0.5-1.0μl裂解液。推荐PCR用Qiage Hotstar Taq DNA polymerase或Sigma JumpStart Taq DNA polymerase。 * Lysis using rotation hybridization oven. ** Lysis using rocking plate. Wash cells in 96-well plate twice with phosphate buffered saline and add 60 µl DirectPCR Reagent (Cell), which has been 2-fold diluted. Incubate at 55°C overnight. Place the 96-well plate in the wet chamber and float the chamber on the 85°C water bath for 1.5 hrs. Pipette up and down several times. Take 1 µl of lysates for PCR. 下载:DirectPCR Lysis Reagent (Cell) Protocol Manual | |||||||
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