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几丁质酶活性检测试剂盒-2022动态已更新《采购/推荐》

点击次数:11704 发布时间:2022/7/20 17:23:04

几丁质酶活性检测试剂盒-2022动态已更新《采购/推荐》


几丁质酶要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨),以及真菌类的细胞壁中。而几丁质酶(EC 3.2.1.14)可催化几丁质水解,具有抵御真菌侵染的作用,成为抗真菌病害的研究热点。几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸产生棕红色化合物,在540nm 处有特征吸收峰,吸收值增加速率反映了几丁质酶的活性。


操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1、组织样本的处理:按照组织质量(g):提取液体积 (mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃,离心 20min,取上清,置于冰上待测。
2、真菌样本的处理:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声破碎细胞(功率 200w,超声 3s,间隔 7s,总时间 3min);然后 10000g,4℃,离心20min,取上清,置于冰上待测。
3、培养液等液体样本的处理:直接测定。


注意事项:
1、 反应结束后尽快进行比色。
2、 OD 值大于1.5,样本适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数;或者缩短37℃水浴时间到X小时(如0.5小时),按照原先计算公式得到的结果再除以X。


几丁质是广泛存在于自然界的一种含氮多糖类生物性高分子,主要的来源为虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨),以及真菌类的细胞壁等。其蕴藏量在地球上的天然高分子中占第二位,估计每年自然界生物的合成量可达1×1011吨,仅次于纤维素。
一般由虾蟹壳提炼的几丁质,约含有15%的胺基(-NH2)与85%的乙醯基(-COCH3)。几丁质不溶于一般的弱无机酸或有机溶剂,且不溶于碱液中,只溶于强无机酸。几丁质具有强吸湿性,保湿效果亦相当好,并且具有吸附重金属离子的功能。
 

原创作者:南京亿迅生物科技有限公司

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