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技术文章
丙二醛(MDA)测试盒的测定原理
点击次数:13268 发布时间:2017/12/6 16:03:57
丙二醛(MDA)测试盒的测定原理
测试原理:
过氧化脂质降解产物中的丙二醛 (MDA)可与硫代巴比妥酸缩合,形成红色产物,在 532nm处有吸收峰。因底物为硫代巴比妥酸(Thibabituric Acid TBA)所以此法称TBA法。
测定意义:
机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,PUFA),引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化物。如:醛基(丙二醛MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基,以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的脂类分解产物,而且通过链式或链式支链反应,放大活性氧的作用。因此,初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成,这些分解产物中,一些是无害的,另一些则能引起细胞代谢及功能障碍,甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸(PUFA)的过氧化引起细胞损伤,而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。因而测试 MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度,间接地反映出细胞损伤的程度。
MDA的测定常常与SOD的测定相互配合,SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力,而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度,通过SOD与MDA的结果分析有助于医学、生物学、药理及工农业生产的发展。
丙二醛(MDA)测试盒的测定原理
试剂盒组成与配制(100T/96样):
试剂一:液体20ml×1瓶,室温保存。(天冷时会凝固,每次测试前适当水浴加温以加速溶解,
直至透明方可应用)。
试剂二:液体12ml×1瓶,用时每瓶加340ml双蒸水混匀,4℃冷藏(注意不要碰到皮肤上)。
试剂三:粉剂×1支,用时将粉剂加入到90℃~100℃的热双蒸水60ml中,(在溶解过程中可
适当加热),充分溶解后用双蒸水补足至60ml再加冰醋酸60ml,混匀,配好的试剂
避光冷藏。(冰醋酸自备)
标准品:10nmol/ml四乙氧基丙烷5ml×1瓶,4℃冷藏。
[注]:冰醋酸(分析纯,乙酸浓度≥99.5%);测试盒冷藏至少可保存一年。
试剂盒组成与配制(50T/48样):
试剂一:液体10ml×1瓶,室温保存。(天冷时会凝固,每次测试前适当水浴加温以加速溶解,直至透明方可应用)。
试剂二:液体6ml×1瓶,用时加170ml双蒸水混匀,4℃冷藏。(注意不要碰到皮肤上)。
试剂三:粉剂×1支,用时将粉剂加入到 90℃~100℃的热双蒸水30ml中,(在溶解过程中可适当加热),充分溶解后用双蒸水补足至30ml再加冰醋酸30ml,混匀,配好的试剂避光冷藏。(冰醋酸自备)
标准品:10nmol/ml四乙氧基丙烷5ml×1瓶,4℃冷藏。
丙二醛(MDA)测试盒的测定原理
原创作者:南京亿迅生物科技有限公司