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羟自由基清除能力测定试剂盒说明书
点击次数：12276 发布时间：2017/12/27 10:21:09
羟自由基清除能力测定试剂盒说明书
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子，造成细胞结构和功能受损，进而导致
体内代谢引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标，在抗氧化类
保健品和药品研究中得到广泛应用。
测定原理：
H2O2/ Fe2+ 通过 Fenton 反应产生羟自由基，将邻二氮菲- Fe2+水溶液中 Fe2+氧化为 Fe3+ ，导
致 536nm 吸光度下降，样品对 536nm 吸光度下降速率的抑制程度，反映了样品清除羟自由
基的能力。
自备实验用品：
恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液：液体 100 mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体 15 mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体 3 mL×1 瓶，4℃保存。
试剂四：液体 3 mL×1 瓶，4℃保存。
羟自由基清除能力测定试剂盒说明书
样品的制备：
1. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，
加入 1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2. 血清、果汁等液体样品可直接测定。
3. 提取物（或者药物）可配制成一定浓度，如 5 mg/mL。
操作步骤：
1、 分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 536nm，蒸馏水调零。
注意：
空白管和标准管只需测定一次。
计算公式:羟自由基清除率 D% =（A 测-A 对）÷（A 空-A 对）×100%A 空、A 对、A 测：空白管、对照管和测定管的吸光值。
注意事项:
为了比较不同样品羟自由基清除能力，对于同一批样品必须加入等量的样品，浆、果汁等液体样品加入同样体积，提取物（或者药物）配制成同样浓
羟自由基清除能力测定试剂盒说明书
注意：
空白管和标准管只需测定一次。
计算公式:羟自由基清除率 D% =（A 测-A 对）÷（A 空-A 对）×100%A 空、A 对、A 测：空白管、对照管和测定管的吸光值。
注意事项:
为了比较不同样品羟自由基清除能力，对于同一批样品必须加入等量的样品，浆、果汁等液体样品加入同样体积，提取物（或者药物）配制成同样浓
羟自由基清除能力测定试剂盒说明书
原创作者：南京亿迅生物科技有限公司
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