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放射免疫分析是由Yalow和Berson于1960年创建的标记免疫分析技术。由于标记物放射性核素的检测灵敏性，本法的灵敏度高达ng甚至pg水平。测定的准确性良好，ng量的回收率接近100％。

放射免疫分析由于敏感度高、特异性强、精密度高、并可测定小分子量和大分子量物质，所以在医学检验中应用极为广泛，常用于测定各种激素（如甲状腺激素、性激素、胰岛素等）、微量蛋白质、肿瘤标志物（如AFP、CEA、CA-125、CA-199等）和药物（如氯丙嗪、庆大霉素等）等。各种检测项目均有试剂盒供应，所以在国内被广泛采用。

放射免疫分析（RIA）是以放射性核素作示踪剂的标记免疫分析方法，它具有高度灵敏性、特异性和精确性等特点，特别适用于激素、多肽等含量微少物质的超微量分析。自20世纪50年代末首创以来，RIA被广泛地应用于生物医学的各个领域。
经典RIA是采用标记抗原和非标记抗原竞争性结合有限量特异性抗体的反应。
RIA具体测定方法包括以下三个主要步骤：

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（一）抗原抗体反应
根据RIA原理，将未标记抗原（标准品和待测样品）、标记抗原和特异性抗体加入反应试管中，在一定条件（温度、时间及介质pH）下进行竞争抑制反应。

（二）分离结合与游离标志物
RIA反应平衡后，标记抗原与试剂抗体形成免疫复合物（B）。由于其含量极少，不能自行沉淀，因此需加入适当的沉淀剂才能将其彻底沉淀，然后经离心使其与游离的标记抗原（F）分离。某些小分子抗原，也可采用吸附法分离B与F。
理想的分离方法应分离彻底、迅速；分离试剂和过程不影响反应平衡，而且效果不受反应介质因素的影响；操作应简单、重复性好以及经济。

（三）放射性测量及数据处理
分离B、F后，既可对标记抗原抗体复合物（B）进行放射性测量，也可根据RIA实验方法及目的，测定游离标记抗原（F）。绘制标准曲线（剂量-反应曲线），样品管以其测量或计算的反应参数，通过标准曲线即可查出相应的待检抗原浓度，目前已普遍采用计算机进行数据处理、自动绘制标准曲线和打印样品抗原浓度。

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原创作者：南京亿迅生物科技有限公司