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超氧阴离子清除能力试剂盒操作步骤
点击次数:11886 发布时间:2020/6/11 11:41:01
超氧阴离子清除能力试剂盒操作步骤
超氧自由基,亦称过氧自由基, superoxide radical, .O2-。人体内产生的一种活性氧自由基,能引发体内脂质过氧化,加快从皮肤到内部器官整个肌体的衰老过程,并可诱发皮肤病变、心血管疾病、癌症等, 严重危害人体健康,人体通过超氧化物歧化酶(SOD)将其转化成过氧化氢和氧气除去。
产品说明:
超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基,可攻击生物大分子,如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等,使其交链或者断裂,引起细胞结构和功能的破坏,与机体衰老和病变有很密切的关系,清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。
AP-TEMED系统产生超氧阴离子,与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-与对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,样品对超氧阴离子的清除能力与530nm 的吸光值呈负相关。
操作步骤: 一、样品处理
1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)
加入提取液,冰浴匀浆后于4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。
2. 细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入
1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后4℃,
10000g离心10min,取上清置于冰上待测。
3. 培养液或其它液体:直接检测。
4. 粉剂药物可配制成相同浓度,比如1mg/mL。
所谓自由基,是指带有不配对的电子的分子基因。自由基的种类很多,用来说明衰老发生机制的自由基,主要是超氧自由基、羟自由基和类脂质过氧化自由基。其中,超氧自由基作用的产物,都是强氧化剂,可使类脂质中的不饱和脂肪酸氧化为类脂过氧化物。它们都是引发脂质过氧化自由基反应的氧化剂,在正常情况下,由于生物体内存在自由基清除剂,如性激素、SOD、过氧化氢酶等使生物体内自由基的产生与清除保持相对平衡,并参与许多正常的生理生化反应。若自由基清除剂的合成恶性化或自由基反应发生紊乱,则会导致机体一系列的病理改变。
超氧阴离子清除能力试剂盒操作步骤
原创作者:南京亿迅生物科技有限公司