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技术文章

Western 快速封闭液-产品特点

点击次数:11633 发布时间:2023/5/5 17:22:22

Western 快速封闭液-产品特点

(快速封闭液)是新一代的即用型、快速Western封闭液。封闭时间仅需 10 分钟,效果优于脱脂奶粉、BSA、酪蛋白等传统封闭液,简化了 Western 印迹方案。使用快速封闭液封闭可阻止抗体检测期间的非特异性结合,但允许进行特异性检测。与传统封闭液相比,有更高的信号,更低的背景值,信噪比更高。

该试剂不含有哺乳动物来源的蛋白成分,避免与抗体发生交叉反应。该缓冲液可与磷酸化的抗体以及NC膜和 PVDF 膜兼容。但不适用于生物素标记的抗体。

产品特点
1)即用型封闭液,无需配制,使用便捷;
2)封闭时间短,仅需10 min,快速;
3)背景低、信噪比高,优于常规奶粉、BSA、酪蛋白等封闭效果;
4)不含哺乳动物来源的蛋白,确保低背景和高信噪比,可兼容磷酸化的抗体。

 
操作方法
1) 完成转膜后,将膜移入到平皿或者其他适合的容器中(可以不洗涤膜)。
2) 根据膜的大小,加入适量体积的 Fast Blocking Western 封闭液,确保充分浸没覆盖膜,对于 7.5x
8 cm 的膜推荐使用量 5-10 mL。
3) 置于水平摇床上,室温条件下振荡孵育10分钟。
4) 取出封闭完成的膜,用洗涤液冲洗膜2-3次,即可用于一抗孵育等后续 Western blot 实验。
 
注意事项
1)通常用于 PVDF 膜或 NC 膜的封闭时间为10分钟。对于背景低的抗体,可以缩短到5分钟,而对于一些背景非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。
2)由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的,因此对于一些特殊的实验或抗体,可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。
3)信号弱或者无信号:有可能是上样量不足;转膜效率低;抗体效价低,特异性差等原因造成,需要根据实验情况优化实验条件。
4)背景高:有可能是抗体使用量过多;膜洗涤时间不足;抗体和封闭液发生交叉反应;试剂或仪器设备被污染等原因造成,需要根据实验具体情况进行调整。
5)为了您的安全和健康,实验时请穿实验服并戴一次性手套操作。
6)本产品仅作科研用途!
 

原创作者:南京亿迅生物科技有限公司

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