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DAB染色液的使用原理及注意事项！
点击次数：12548 发布时间：2021/11/3 13:44:44
DAB染色液的使用原理及注意事项！
用途：
用途：
DAB染色液用于免疫组化染色。应用在Dako自动染色系统上。DAB染色液运用还原态无色亚甲蓝则在病变细胞内Fe2+强烈催化下,迅速被细胞内广泛存在的活性氧氧化,变为有色的氧化态亚甲基蓝。
原理：
细胞颗粒中的过氧化物酶,能将过氧化氢中的氧释放出来，氧化二氨基联苯胺，形成金黄色沉淀而定位于过氧化物酶活性的部位。
使用方法：
1.DAB显色液配制
10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin3 ; 3-二氨基联苯胺) +0.3%(WV) NiCI2 或CoCI21mL 显色时加入5-1 0mL 30%H202混匀后立即使用
2.准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗 (或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。
3.酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。
4.置于平式摇荡仪上，在室温下孵育2至5分钟，避免光照(暗室操作)直至棕褐色沉淀出
5.用镊子夹起固相膜放进无离 子水里清洗。
6.空气中晾干，并做好记录。
注意事项：
1 . DAB溶液应低温密封保存。如有结晶析出;应确保结晶玩全溶解再行使用:
2.显色工作液应现用现配,新鲜制的工作液应为无色或浅棕色;如颜色过深,请勿使用:
3. DAB在常温下不稳定,每次取用后均应及时加盖密封放回冰箱,以免因DAB分解影响实验,或因渗漏造成实验环境污染; .
4.DAB有潜在致突变作用，操作时应注意穿戴好防护用具。
原理：
细胞颗粒中的过氧化物酶,能将过氧化氢中的氧释放出来，氧化二氨基联苯胺，形成金黄色沉淀而定位于过氧化物酶活性的部位。
使用方法：
1.DAB显色液配制
10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin3 ; 3-二氨基联苯胺) +0.3%(WV) NiCI2 或CoCI21mL 显色时加入5-1 0mL 30%H202混匀后立即使用
2.准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗 (或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。
3.酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。
4.置于平式摇荡仪上，在室温下孵育2至5分钟，避免光照(暗室操作)直至棕褐色沉淀出
5.用镊子夹起固相膜放进无离 子水里清洗。
6.空气中晾干，并做好记录。
注意事项：
1 . DAB溶液应低温密封保存。如有结晶析出;应确保结晶玩全溶解再行使用:
2.显色工作液应现用现配,新鲜制的工作液应为无色或浅棕色;如颜色过深,请勿使用:
3. DAB在常温下不稳定,每次取用后均应及时加盖密封放回冰箱,以免因DAB分解影响实验,或因渗漏造成实验环境污染; .
4.DAB有潜在致突变作用，操作时应注意穿戴好防护用具。
原创作者：厦门盈鑫发科技有限公司
