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公司新闻
T4多聚核苷酸激酶使用建议
点击次数:694发布时间:2021/6/30
T4多聚核苷酸激酶使用建议
产品描述:
T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK),是一种多聚核苷酸5'羟基激酶,能够催化ATP的γ-位磷酸向双链/单链DNA或RNA以及带有
3´磷酸基团的单核苷酸5´-羟基进行转移和交换:5´-OH + NTP5´P + NDP;该酶还具有3´磷酸酶活性,将3´-磷酸基团从
寡核苷酸的3´磷酸末端、脱氧3´ -单磷酸核苷和脱氧3´-二磷酸核苷上水解掉。
产品用途:
1)引物或PCR产物的5´末端磷酸化以便进行连接反应;
2)合成DNA接头 (Linker) 的5´末端磷酸化以便进行连接反应;
3)DNA及RNA 5´末端的标记,用作寡核苷酸探针。
使用建议:
1×T4 PNK 反应缓冲液中不含 ATP,需在反应体系中加入终浓度为 1mM 的 ATP,也可以使用 T4 DNA 连接酶的反应液代替。
铵离子强烈抑制 T4 PNK 活性,故 DNA 应溶于不含铵盐的溶液中。DTT 氧化会造成酶活性下降,当缓冲液不新鲜时,需补加DTT。
保存温度:-20℃。
质量保证:
经多次柱纯化,SDS-PAGE 胶检测仅可见清晰单一的目的条带,PCR 方法检测无大肠杆菌 DNA 残留,无核酸内、外切酶、磷酸酶以及 RNA 酶活性污染。活性