睾酮具有维持肌肉强度及质量、维持骨质密度及强度、提神及提升体能等作用。睾酮会影响许多身体系统和功能，包括：血生成、体内钙平衡、骨矿化作用、脂代谢、糖代谢和前列腺增长。它是主要男性性激素及同化激素。不论是男性或女性，它对健康及有着重要影响，包括增强力量、免疫功能、对抗骨质疏松症等功效。

睾酮首先是在1935年从一头雄牛中抽取，经历多年，已经发展了多种不同医药种类。现时在北美洲睾酮可以有注射式（如环戊丙酸睾酮及庚酸睾酮）、口服、口颊及皮肤渗透式包、膏与凝胶。睾酮*初用途是治疗性腺功能低下症，即太少或没有自然睾酮分泌病症。在荷尔蒙补充疗法（HRT）下适当地使用睾酮，可以维持血液中睾酮份量达至正常水平。

大鼠睾酮（T）ELISA试剂盒

在其它脊索动物组织内也会有雄激素受体，而雄性及雌性对睾酮反应也相当一致。在出生前雄性与雌性睾酮剂量差异，会导致在青春期或整个生命上生物差异。
与其它荷尔蒙一样，睾酮及其它同化激素除了补充用法外，亦有其它用法，但相对附带着更多副作用。如不育、或不举、骨质疏松症、等。1940年代后期，睾酮更被以抗衰老药物为招徕，情况与现时生长激素一样。利用睾酮男性化作用，变性男人（即由女性经由变性成为男性）会以睾酮作为荷尔蒙补充疗法，以达至一般自然男人睾酮水平。同样地，变性女人会使用药物抑制睾酮水平，以让雌激素发挥效用。

睾酮芳构化成雌二醇会对脑及骨这两个人体重要组织构成主要影响。在骨中，雌二醇加速了软骨成长为骨过程，使骨端接合及完成生长程序。在中枢神经中，雌二醇是给予下视丘主要回馈讯号，尤其在影响排卵素分泌。在很多哺乳动物脑部中，某些性别差异区域在出生前或产期雄性化，都是受着睾酮所产生雌二醇影响，决定将来雄性性行为。

雄激素助长蛋白质合成及拥有雄激素受体组织生长，睾酮效用可以分为合成代谢及雄性化效应。合成代谢效应包括肌肉质量及力量增长、增加骨质密度及强度、刺激线性生长及骨骼成熟等。