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游离甲状腺素(FT4)放免试剂盒
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游离甲状腺素(FT4)放免试剂盒
甲状腺素是由甲状腺滤泡上皮细胞合成和分泌激素。妊shen、哺乳、肝硬化综合征等可使血清甲状腺素结合球蛋白浓度及其结合力发生改变,可使游离甲状腺素浓度发生变化。
[试验原理]
人体血液中三石典甲腺原氨酸 T3和甲状腺素 T4绝大部分与甲状腺结合球蛋白和白蛋白结合进行循环,但结合部分激素没有生物活性,具有生物活性只是极小部分游离激素,即占总三石典甲腺原氨酸 TT30.3%游离三石典甲腺原氨酸 FT3 和占总甲状腺素 TT40.03%游离甲状腺素 FT4。所以血清中 FT3和 FT4浓度更能反映甲状腺功能状态水平。本品采用了第二抗体+聚已二醇沉淀法放射免疫分析试验原理:含游离甲状腺素(FreeThyroxine)样品和 125I 标记游离甲状腺素(FT4)与相应抗体反应形成抗原抗体复合物。反应后加入二抗及 PEG,使免疫复合物沉淀,离心,测沉淀放射性计数。通过标准曲线得到样本中 FT4浓度。
[实验方法]
1、 将实验所需试剂及样本放置室温,平衡至少 30 分钟以上才可进行操作;
2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管进行编号,所有实验均做双管重复;
3、 取每个浓度标准品、质控血清和样本 50µl 加入相应编号试管中;
4、 每管均各加入 100µl 标记物工作液;
5、 除 T、NSB 管外,每管均各加入 100µl 抗体工作液,充分混匀;
6、 37℃温育 1 小时;
7、 每管均各加入 500µl 分离剂后,充分混匀;
8、 离心 3500 转/分,20 分钟后,吸去或倾倒掉上清液;
9、 用 γ-计数器测定每管 1 分钟放射性强度计数;
10、 从标准曲线上读取样本及质控血清浓度。
[实验过程中应注意]
1、 γ-计数器本底计数应≤100CPM/分,效率应≥75%;
2、 加入放射性标记物时,应做好防护、小心谨慎,以避免造成放射性污染;
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3、 如果某一个样本测定值高于zui高浓度标准品浓度,用零标准品以 1:2 或 1:
4 比例稀释样本后重新测试,测试结果乘以相应稀释倍数。
游离甲状腺素(FT4)放免试剂盒