细胞瞬时转染

服务简介：

     细胞转染的基本原理将外源DNA克隆到载体上后导入细胞，借助宿主细胞表达载体上的目的片段，从而使目的基因在细胞中发挥功能。目前转染方法有多种，如脂质体转染法、磷酸钙－DNA共沉淀法、电穿孔转染法、腺病毒感染等。
      常规转染技术可分为两大类，一类是瞬时转染，另一类是稳定转染，前者转染的外源DNA不整合到宿主染色体中，通常表达只持续几天，一般在转染24-72小时后检测。后者转染的外源DNA将整合到宿主染色体中，可持续性表达，一般可用于稳定细胞株的构建。
     本公司使用商用化的lipofectamine2000作为转染试剂，所有实验步骤及试剂按照厂家建议的用量。实验中使用转染试剂在常温条件下同待转染质粒/RNA在培养基中组装成复合体，按照一定的比例将上述装配产物加入到对数生长期的细胞中。待培养一段时间后，可结合下游实验检测项目。

 服务流程：

（1）质粒：
a. 进行预实验，通过转染含有报告基因的质粒优化转染条件；
b. 转染条件确定后，按照客户方案进行转染；
c. qPCR或Western Blot检测转染效率。
（2）SiRNA：
a. 根据基因序列，设计并合成siRNA；
b. 进行预实验，通过转染带有荧光标记的阴性对照siRNA优化转染条件；
c. 通过qPCR和Western Blot验证siRNA的沉默效率，筛选siRNA*佳使用浓度。

客户提供：
待转染细胞株及细胞培养的相关信息，待转染的质粒信息，目的蛋白一抗；待转染的SiRNA，预测被调控基因的蛋白的抗体。
交付内容：
瞬时转染的实验报告单，含实验原始实验图片、实验方法、siRNA序列等。

收费标准/服务周期/提供结果：
欢迎咨询详谈，我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。

【本公司合作项目】
慢病毒，腺病毒，RNAi类，分子生物实验，病理实验，免疫学实验，细胞实验，动物实验，蛋白组学实验等，能够进行药效学评价、毒理学评价、细胞药筛、动物建模、病理检测、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析服务！

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