细胞周期检测/PI检测
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详细内容
细胞周期检测
服务原理:
细胞周期(Cell Cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,细胞的遗传物质复制并均等地分配给两个子细胞。细胞周期分为间期与分裂期两个阶段。间期又分为三期:即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。某些细胞在分裂结束后暂时离开细胞周期,停止细胞分裂,执行一定生物学功能(G0期)。
流式细胞仪PI染色法检测细胞周期的原理:由于细胞周期各时相的DNA 含量不同,通常正常细胞的G1/ G0 期具有二倍体细胞的DNA含量(2N) ,而 G2/ M 期具有四倍体细胞的DNA 含量(4N) ,而S期的DNA 含量介于二倍体和四倍体之间。PI可以与DNA结合,其荧光强度直接反映了细胞内DNA含量。因此,通过流式细胞仪PI染色法对细胞内DNA含量进行检测时,可以将细胞周期各时相区分为G1/G0 期,S 期和G2/M 期,获得的流式直方图对应的各细胞周期可通过特殊软件计算各时相的细胞百分率。
服务应用:
1、肿瘤细胞周期的检测
2、目的基因瞬转/稳转细胞系的细胞周期研究
3、小分子化合物/多肽等药物筛选及功能安全性研究
4、中药/中间体等药物筛选及功能安全性研究
5、目的基因过表达的基因功能研究
6、目的基因RNAi干扰的基因功能研究
7、microRNA过表达/干扰的调控机制研究
服务流程:
1. 收集细胞;
2.3000~5000rpm离心5min,收集沉淀,重悬于200ul的PBS中,再次离心收集沉淀;
3.75%冰冻乙醇(-20度保存)4度固定过夜or-20度固定1h;
4.离心收集沉淀,PBS洗一次(视沉淀量可忽略);
5. 5.沉淀重悬于200~500ul的PBS,加入Rnase A 37度水浴1h;
6.6.400目纱布过滤至流式管,加入PI染色,4度避光30min-1h,上机器
收费标准/服务周期/提供结果:
欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
【本公司合作项目】
慢病毒,腺病毒,RNAi类,分子生物实验,病理实验,免疫学实验,细胞实验,动物实验,蛋白组学实验等,能够进行药效学评价、毒理学评价、细胞药筛、动物建模、病理检测、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析服务!
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